[發(fā)明專利]一種抑制煙草連作障礙的微生物菌劑

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• 申請日: 2020-03-24
• 公開（公告）號: CN111440738A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何元勝;曹敬東;吳巨廣;鄭元仙;許銀蓮;王繼明;楊敏;劉佳妮;鐘宇;魏環(huán)宇;王啟宇;方宇;蘇源;余磊
• 申請（專利權(quán)）人: 云南省煙草公司臨滄市公司;昆明學(xué)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C05G3/00;C05G3/80;C05G3/60;C12R1/38;C12R1/07;C12R1/065;C12R1/67
• 代理公司: 北京棘龍知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11740
• 代理人: 戴麗偉

1.一種抑制煙草連作障礙的微生物菌劑，其特征在于，包括：

固氮菌菌劑，通過自身固氮功能為煙草提供氮肥；

解鉀菌菌劑，將土壤中的有機磷降解為無機磷，為煙草提供磷素；

解磷菌菌劑，將土壤中的有機鉀降解為無機鉀，為煙草提供鉀素；

苯甲酸降解菌菌劑，將煙草連作根系產(chǎn)生的酚酸類物質(zhì)進行降解，降低煙草根系連作的化感與自毒作用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于，所述的固氮菌菌劑為圓褐固氮菌菌株培養(yǎng)后制成的粉末狀菌劑；

解鉀菌菌劑為膠凍樣芽孢桿菌菌株培養(yǎng)后制成的粉末狀菌劑；

解磷菌菌劑為假單胞桿菌菌株培養(yǎng)后制成的粉末狀混合菌劑；

苯甲酸降解菌菌劑為黃曲霉菌菌株培養(yǎng)后制成的粉末狀菌劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微生物菌劑，其特征在于，由固氮菌菌劑、解鉀菌菌劑、解磷菌菌劑和苯甲酸降解菌菌劑按1：1：1：1的比例混合。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述的固氮菌菌劑的制備方法如下：

步驟1、配制無氮培養(yǎng)基：蔗糖10份、磷酸氫二鉀0.2份、硫酸鎂0.2份、氯化鈉0.2份、硫酸鈣0.2份、碳酸鈣5份、瓊脂20份、無菌蒸餾水1000份制成pH7.0-7.2的液體無氮培養(yǎng)基；

步驟2、接種：配制的液體無氮培養(yǎng)基滅菌后于超凈工作臺接種圓褐固氮菌菌株，接種數(shù)按1×10³個/mL的用量接種圓褐固氮菌，封口后放入搖床中28℃-37℃培養(yǎng)5-7天，得到固氮菌菌液；

步驟3、配制固氮菌菌劑制備培養(yǎng)基：面粉30份、蛋白胨10份、稻殼20份、鋸末40份、蒸餾水80份攪拌均勻，封口、滅菌；

步驟4、將固氮菌菌液加入固氮菌菌劑制備培養(yǎng)基中，28℃～37℃培養(yǎng)5-7天，每隔3天攪拌一次，發(fā)酵完成后于烘干箱中28℃-37℃烘干，粉末粉碎機中粉碎，得到固氮菌菌劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述的解鉀菌菌劑的制備方法如下：

步驟1、配制解鉀菌培養(yǎng)基：蔗糖2份、蛋白胨0.5份、硫酸鎂0.1份、磷酸氫二鉀0.2份、碳酸鈣0.2份、瓊脂20份、無菌蒸餾水1000份制成pH7.5的液體解鉀菌培養(yǎng)基；

步驟2、接種：配制的液體解鉀菌培養(yǎng)基滅菌后于超凈工作臺接種膠凍樣芽孢桿菌菌株，接種量1×10³個/mL封口后放入搖床中28℃-37℃培養(yǎng)5-7天，得到解鉀菌菌液；

步驟3、配制解鉀菌菌劑制備培養(yǎng)基：面粉30份、蛋白胨10份、稻殼20份、鋸末40份、蒸餾水80份攪拌均勻，封口、滅菌；

步驟4、將解鉀菌菌液加入解鉀菌菌劑制備培養(yǎng)基中，28℃～37℃培養(yǎng)5-7天，每隔3天攪拌一次，發(fā)酵完成后于烘干箱中28℃-37℃烘干，粉末粉碎機中粉碎，得到解鉀菌菌劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述的解磷菌菌劑的制備方法如下：

步驟1、配制解磷菌培養(yǎng)基：葡萄糖2份份、蛋白胨0.5份、硫酸鎂0.1份、磷酸氫二鉀0.2份、碳酸鈣0.2份、瓊脂20份、無菌蒸餾水1000份制成pH7.5的液體解鉀菌培養(yǎng)基；

步驟2、接種：配制的液體解鉀菌培養(yǎng)基滅菌后于超凈工作臺接種假單胞桿菌，接種量均為1×10³個/mL，封口后放入搖床中28℃-37℃培養(yǎng)5-7天，得到假單胞桿菌菌液；

步驟3、配制解鉀菌菌劑制備培養(yǎng)基：面粉30份、蛋白胨10份、稻殼20份、鋸末40份、蒸餾水80份攪拌均勻，封口、滅菌，得到解鉀菌菌劑制備培養(yǎng)基；

步驟4、將假單胞桿菌菌液加入解鉀菌菌劑制備培養(yǎng)基中，28℃～37℃培養(yǎng)5-7天，每隔3天攪拌一次，發(fā)酵完成后于烘干箱中28℃-37℃烘干，粉末粉碎機中粉碎，得到假單胞桿菌菌劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其特征在于，所述的苯甲酸降解菌菌劑的制備方法如下：

步驟1、配制苯甲酸降解菌培養(yǎng)基：葡萄糖2份份、牛肉胨0.5份、硫酸鎂0.1份、磷酸氫二鉀0.2份、碳酸鈣0.2份、無菌蒸餾水1000份制成pH7.5的液體苯甲酸降解菌培養(yǎng)基；

步驟2、接種：配制的液體苯甲酸降解菌培養(yǎng)基滅菌后于超凈工作臺接種黃曲霉菌，接種量均為1×10³個/mL封口后放入搖床中28℃-37℃培養(yǎng)5-7天，得到苯甲酸降解菌菌液；

步驟3、配制苯甲酸降解菌菌劑制備培養(yǎng)基：面粉30份、牛肉胨10份、稻殼20份、鋸末40份、蒸餾水80份攪拌均勻，封口、滅菌，得到苯甲酸降解菌菌劑制備培養(yǎng)基；

步驟4、將苯甲酸降解菌菌液加入苯甲酸降解菌菌劑制備培養(yǎng)基中，28℃～37℃培養(yǎng)5-7天，每隔3天攪拌一次，發(fā)酵完成后于烘干箱中28℃-37℃烘干，粉末粉碎機中粉碎，得到苯甲酸降解菌菌劑。