[發明專利]一種POLN基因突變位點檢測試劑盒及其用途

在審

• 申請號: 202010212334.0
• 申請日: 2020-03-24
• 公開（公告）號: CN111378752A
• 公開（公告）日: 2020-07-07
• 發明（設計）人: 原雅藝;董娟聰;左雅慧;黨旭紅;董豫陽;任越;張睿鳳;劉紅艷;張忠新;王婧潔
• 申請（專利權）人: 中國輻射防護研究院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京天悅專利代理事務所(普通合伙) 11311
• 代理人: 田明;周敏毅

本發明屬于生物檢測技術領域，涉及一種POLN基因突變位點檢測試劑盒及其用途。所述的檢測試劑盒包含擴增引物與延伸引物，所述的擴增引物的正向引物的序列如SEQ ID NO.3所示，所述的擴增引物的反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示，所述的延伸引物的序列如SEQ ID NO.5所示，所述的POLN基因的序列如SEQ ID NO.1所示，突變后的POLN基因的序列如SEQ ID NO.2所示。本發明的POLN基因突變位點檢測試劑盒能夠效率高、成本低的預測人員輻射敏感性。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，涉及一種POLN基因突變位點檢測試劑盒及其用途。

背景技術

目前，放射療法仍然是現代癌癥治療的主要手段，大約50％的癌癥患者需要放射治療。但是，接受相同劑量放射治療，患者表現出的放射毒性不同：少數人沒有明顯的毒性作用，大多數人在臨床上有輕度或中度的毒性反應，而少數人導致嚴重的正常組織并發癥，甚至可能危及生命。因此，有必要尋找一種與放射敏感性相關的分子標志物用于預測患者是否為放射敏感性(或放射抗性)個體。

放射敏感性的預測是為了能夠針對個別患者量身定制放射治療方案以改善預后，從而一方面可以降低輻射劑量以降低對敏感個體的毒性，另一方面可以提高輻射劑量以使更多的抗輻射患者得到有效治療。這將最大程度地控制腫瘤，同時最大程度地減少對患者的正常組織的損害。此外，在我國大約有20萬的放射工作人員，放射工作人員在日常工作時要長期接受職業照射，對放射工作人員進行放射敏感性的預測有助于預防和減少職業傷害。

POLN rs2022302位點位于4號染色體2174006處，等位基因為AG，該位點所在基因是編碼DNA聚合酶A型家族成員。編碼的蛋白質在DNA修復和同源重組中起作用。

單核苷酸多態性標記(SNP)是“第三代DNA遺傳標記”，在人類基因組中存在300萬個，被認為是應用前景最好的遺傳標記物。SNP可以真實反映遺傳差異，并與正常組織中輻射誘發的毒性有關。

此外，基質輔助激光解吸電離質譜技術與傳統的以測序和雜交原理為主的基因檢測方法相比，在檢測效率、檢測通量、檢測敏感性、檢測精確性、檢測可重復性、檢測費用等方面都具有無可比擬的優勢。該技術可實現384個樣本同時檢測，每個檢測點檢測只需3-5s時間，可檢測pmol級，準確度達98％以上。因此，利用基質輔助激光解吸電離質譜法進行輻射敏感性判斷能夠快速、準確、高通量、低成本的預測人員輻射敏感性。

發明內容

本發明的首要目的是提供一種POLN基因突變位點檢測試劑盒，以能夠效率高、成本低的預測人員輻射敏感性。

為實現此目的，在基礎的實施方案中，本發明提供一種POLN基因突變位點檢測試劑盒，所述的檢測試劑盒包含擴增引物與延伸引物，

所述的擴增引物的正向引物的序列如SEQ ID NO.3所示，所述的擴增引物的反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示，

所述的延伸引物的序列如SEQ ID NO.5所示，

所述的POLN基因的序列如SEQ ID NO.1所示，所述的突變位點為POLN基因的rs2022302位點(A到G的突變)，突變后的POLN基因的序列如SEQ ID NO.2所示。

在一種優選的實施方案中，本發明提供一種POLN基因突變位點檢測試劑盒，其中所述的擴增引物的正向引物的濃度為2-3μM。

在一種優選的實施方案中，本發明提供一種POLN基因突變位點檢測試劑盒，其中所述的擴增引物的反向引物的濃度為2-3μM。

在一種優選的實施方案中，本發明提供一種POLN基因突變位點檢測試劑盒，其中所述的延伸引物的濃度為3.5-4.5μM。