[發明專利]PDCD11-shRNA及其在治療結直腸癌中的應用

有效

• 申請號: 202010211699.1
• 申請日: 2020-03-24
• 公開（公告）號: CN111394352B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: 張新躍;張杰;丁笠;陳磊;張智萍;劉雅嫻;聶也森;何妍之
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 杜春秋

本發明提出了一種PDCD11?shRNA，為根據核仁蛋白PDCD11的基因序列設計的針對PDCD11的shRNA分子，能夠顯著抑制人結直腸癌細胞HCT116的生長。本發明PDCD11?shRNA的序列如SEQ ID NO:1所示。本發明的優點是能顯著降低HCT116腫瘤細胞內PDCD11的表達水平，顯著抑制細胞的增殖速率。因此，本發明設計的shPDCD11分子具有治療結直腸癌的潛能。

技術領域

本發明涉及一種PDCD11-shRNA及其在作為結直腸癌治療靶點中的應用，分類號為C12N15/113，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

結直腸癌是目前最常見的消化道惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類的生命和健康，其發病率位居常見惡性腫瘤的前列，其病死率也居癌癥死亡的前列。結直腸癌的發生發展是一個多步驟、多階段以及多基因參與的過程，其中基因異常表達在結腸癌發生發展過程中又起著重要作用。因此，尋找出新的結直腸癌治療靶點對疾病的治療，降低直結腸癌死亡率具有重要的科學意義。

腫瘤靶向治療是針對腫瘤特異性表達的功能分子，設計開發靶向性的抑制劑，包括抗體、小分子、生物載體等。該類靶向性分子可以特異性抑制腫瘤細胞的生長、運動及化療抵抗等功能，而對正常的組織細胞不具有破壞作用。因此，靶向治療可以極大的延長患者的生存時間及生存質量。然而，現階段可用的靶向治療靶點有限，可用的靶向藥匱乏，只有極少部分患者可以從靶向治療中受益，因此提供一種新型的腫瘤治療靶點是目前亟需解決的問題。

核仁是細胞核內合成核糖體RNA和組裝核糖體大、小亞基的重要場所（Tan BC, etal. J Biomed Sci. 2012; 19: 57）。核仁蛋白是組成核仁的主要成分，在細胞的蛋白質生物合成中發揮重要作用。研究發現，核仁蛋白能調節細胞增殖（Liu, S. J., et al. WorldJ Gastroenterol. 2004; 10, 1246-1249）、細胞凋亡和細胞周期（Wu, Q., et al. PLoSOne. 2011; 6: e26401）。申請人最近發現，在人結直腸癌細胞中，某些核仁蛋白如RSL1D1高表達，與腫瘤的發生、發展密切相關。

PDCD11 (Programmed cell death 11)是一種核仁蛋白（Scherl A, et al. MolBiol Cell. 2002 13:4100-4109），為18S rRNA的成熟所必需（Sweet T, et al. J CellPhysiol.2008. 214:381-388）。據報道，PDCD11在p53介導的程序性細胞死亡中至關重要（Kevin M.Ryan, et al. Nature. 2000;404: 892-897）。

近年來，RNA干擾技術經歷著高速發展，也為癌癥治療帶來了新的曙光和革命性的轉變。RNA干擾技術作為一種新興的癌癥治療方法，具有巨大的潛力和發展前景。短發夾RNA（short hairpin RNA，shRNA）是一類人工合成的具有緊密的發夾轉彎結構的RNA，它可以通過RNA干擾技術的原理沉默靶向基因的表達。因此，為了研究某個治療靶點在腫瘤治療中的重要性，通常利用shRNA干擾技術進行評估。設計針對某個靶點的shRNA分子，利用所述shRNA分子干擾靶點的表達，從而影響靶點的功能，然后通過考察所述shRNA分子對細胞增殖速率的影響，評估該分子是否具有潛在的腫瘤治療效應。

如何利用RNA干擾技術，研究出特異性針對惡性腫瘤細胞的shRNA，為結直腸癌等相關癌癥的治療提供一種有益的途徑。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，克服現有技術的不足而提供一種PDCD11-shRNA及其在治療結直腸癌中的應用，PDCD11-shRNA是以核仁蛋白PDCD11的基因序列為靶標，設計出的特異性shRNA分子，能夠達到抑制惡性腫瘤細胞生長的目的。