[發(fā)明專利]血管性血友病因子片段和八因子的共表達載體有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010210419.5 | 申請日: | 2020-03-23 |
| 公開(公告)號: | CN111440820B | 公開(公告)日: | 2021-02-05 |
| 發(fā)明(設計)人: | 李齊;張海龍 | 申請(專利權)人: | 莊亞(北京)生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/85 | 分類號: | C12N15/85;C12N15/12;C12N15/62;C12P21/02 |
| 代理公司: | 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400 | 代理人: | 鄔玥;方挺 |
| 地址: | 101102 北京市大興區(qū)北京經*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 血管性 血友病 因子 片段 表達 載體 | ||
1.一種載體,包含:
(a)第一多核苷酸序列,編碼B區(qū)缺失型因子VIII蛋白(FVIII),可操作地連接至第一啟動子,
(b)第二多核苷酸序列,編碼融合蛋白,所述融合蛋白包含截短型血管性血友病因子(vWF)和融合至所述截短型vWF的C端的免疫球蛋白Fc,可操作地連接至第二啟動子,
其中所述截短型vWF的氨基酸序列是SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,或SEQID NO:4。
2.根據權利要求1的載體,其中所述截短型vWF的氨基酸序列是SEQ ID NO:1。
3.根據權利要求1的載體,其中所述截短型vWF的氨基酸序列是SEQ ID NO:2。
4.根據權利要求1的載體,其中所述B區(qū)缺失型FVIII的氨基酸序列是SEQ ID NO:6,7,8,9,或10。
5.根據權利要求4的載體,其中所述B區(qū)缺失型FVIII的氨基酸序列是SEQ ID NO:6。
6.根據權利要求1的載體,其中所述第一多核苷酸序列還包含第一信號序列,且所述第二多核苷酸序列還包含第二信號序列。
7.一種分離的宿主細胞,包含權利要求1的載體。
8.一種制備FVIII的方法,包含以下步驟:
(a)用包含權利要求1的載體的質粒轉染細胞,
(b)篩選分泌FVIII的細胞,
(c)收集所篩選的細胞的上清,以及
(d)從所篩選的上清中純化FVIII。
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