[發明專利]一種犬干擾素CaIFN-λ突變體及其應用

有效

• 申請號: 202010202421.8
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN111233998B
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發明（設計）人: 秦彤;崔尚金
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C07K14/555
• 分類號: C07K14/555;C12N15/20;A61K38/21;A61P31/14
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈

本發明公開了一組重組犬干擾素CaIFN?λ蛋白，即野生型犬干擾素CaIFN?λ蛋白的突變體蛋白。其中3種干擾素CaIFN?λ突變體的生物學活性顯著優于野生型犬干擾素CaIFN?λ。本發明提供的重組野生型犬干擾素CaIFN?λ蛋白具有優良的抗病毒活性，具有開發成為抗病毒藥物和獸醫臨床應用的巨大潛力和價值。

本申請是中國發明申請“CN 201810867859.0，一種重組犬干擾素CaIFN-λ及其應用”的分案申請。

技術領域

本發明屬于基因工程、生物工程領域，具體涉及一種重組犬干擾素及其應用。

背景技術

干擾素(Interferon，IFN)是一組由干擾素誘生劑誘導生物細胞產生的具有多種功能的活性蛋白質(主要是糖蛋白)，它們具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長，以及分化、調節免疫功能等生物活性。干擾素不能直接滅活病毒，而是通過誘導細胞合成抗病毒蛋白(AVP)發揮效應。同時還可增強自然殺傷細胞(NK細胞)、巨噬細胞和T淋巴細胞的活力，從而起到免疫調節作用，并增強抗病毒能力。跟蹤調查發現，干擾素在治療中具有良好的抗病毒和抑制病毒復制等作用，尤其對犬類病毒性疾病具有一定的療效。

根據產生干擾素細胞來源不同、理化性質、生物學活性和其識別受體的差異，可分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。I型干擾素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω，Ⅱ型干擾素僅包括IFN-γ。其中，I型干擾素的抗病毒活性較強，是乙型肝炎等病毒病的有效治療藥物。目前獸醫臨床使用的犬干擾素均為α干擾素，且主要是從大腸桿菌中獲得的基因重組蛋白，僅表現單一亞形，如α-2b等。

λ干擾素(IFN-λ)是最近發現的Ⅲ型干擾素，雖然誘生機制和生物學活性與I型干擾素相似，但兩者的基因、結構和受體不同。人IFN-λ包括IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3，能有效抑制乙肝病毒、丙肝病毒、皰疹病毒和甲型流感病毒的復制。犬IFN-λ(CaIFN-λ)的研究相對較少。

發明內容

為了克服現有技術中存在的缺陷和不足，本發明提供了一種重組犬干擾素CaIFN-λ及其應用。本發明目的通過以下技術方案來實現：

本發明提供了一組重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白，該蛋白為野生型CaIFN-λ的突變體蛋白，在野生型CaIFN-λ序列SEQ ID NO.11的基礎上，所述重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白包含至少一處以下突變：E84G，T94V，T101M。

在某一具體案例中，所述重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白包含2處突變，E84G和T94V、E84G和T101M、或T94V和T101M。

在某一具體案例中，所述重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白包含3處突變，E84G，T94V和T101M。

在某一具體案例中，重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白的氨基酸序列選自SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6。

在某一具體案例中，重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白的氨基酸序列在選自SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6的序列后加入連接序列GSSSS和標簽蛋白HHHHHH。

本發明提供了一種分離的核酸分子，所述核酸分子編碼重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白；優選的，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示。

本發明提供了一種表達盒或載體，所述表達盒或載體包含編碼重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白的核酸分子。

本發明提供了一種重組菌，所述重組菌含有上述核酸分子或表達盒或載體的。

本發明提供了一種重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白、編碼重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白的核酸分子、包含編碼重組犬干擾素CaIFN-λ蛋白的核酸分子的表達盒或載體、和/或重組菌在制備重組犬干擾素CaIFN-λ中的用途。