[發(fā)明專利]一種深色有隔內(nèi)生真菌菌液高效規(guī)模化產(chǎn)運聯(lián)動生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010200086.8
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN111394256B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發(fā)明（設計）人: 畢銀麗;任穎;全文智
• 申請（專利權(quán)）人: 中國礦業(yè)大學（北京）;北京合生元生態(tài)環(huán)境工程技術有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01C1/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

本發(fā)明公開了一種深色有隔內(nèi)生真菌菌液高效規(guī)模化產(chǎn)運聯(lián)動生產(chǎn)方法。本發(fā)明提供了深色有隔內(nèi)生真菌(Darksidea sp)針A2?7，其保藏編號為CGMCC No.18811。本發(fā)明還保護針A2?7的培養(yǎng)方法，包括如下步驟：采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)針A2?7，培養(yǎng)時間為6天。第8天生物量達到最大。第6天生長率最快，生命力最強。由于針A2?7具有重大的應用推廣價值，因此實際應用中涉及將針A2?7進行不同地域的運輸。考慮最佳生長率及生物量時間差，在培養(yǎng)至第6天開始運輸最佳。結(jié)合菌液的運輸時間，對于野外菌液的應用可以有效節(jié)約室內(nèi)培養(yǎng)時間。本發(fā)明為野外深色有隔內(nèi)生真菌的運輸提供重要數(shù)據(jù)支撐，對進一步推進微生物復墾技術應用實踐具有重要意義。

技術領域

本發(fā)明屬于微生物領域，具體涉及一種深色有隔內(nèi)生真菌菌液高效規(guī)模化產(chǎn)運聯(lián)動生產(chǎn)方法。

背景技術

深色有隔內(nèi)生真菌(Dark septate endophyte，DSE)泛指一群定居于植物根內(nèi)，并能形成典型的有隔菌絲和微菌核等結(jié)構(gòu)的小型土壤內(nèi)生真菌。這類真菌廣泛存在于健康植物根表皮、皮層或維管組織，生境廣泛，極地、荒漠、重金屬污染、農(nóng)田等均有深色有隔內(nèi)生真菌分布。

大量研究表明深色有隔內(nèi)生真菌可促進多種植物生長、改善光合作用、促進營養(yǎng)吸收、提高植物抗逆性及提高植物次生代謝物濃度。隨著深色有隔內(nèi)生真菌的生態(tài)作用逐漸被揭示，深色有隔內(nèi)生真菌菌劑的研發(fā)也逐漸成為研究的熱點與難點。

目前，深色有隔內(nèi)生真菌菌劑以液體為主，其應用多為室內(nèi)應用，即用即培養(yǎng)，且對其培養(yǎng)時間無準確嚴格的定量研究。而在野外的推廣使用中，不僅對菌液的需求量較大，而且菌液運輸也是其研究的重點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種深色有隔內(nèi)生真菌菌液高效規(guī)模化產(chǎn)運聯(lián)動生產(chǎn)方法。

本發(fā)明提供了深色有隔內(nèi)生真菌(Darksidea sp)針A2-7。針A2-7已于2019年11月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.18811。

本發(fā)明還保護針A2-7的培養(yǎng)方法，包括如下步驟：采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)針A2-7。

所述培養(yǎng)方法中，培養(yǎng)時間為6天。

示例性的，所述液體培養(yǎng)基為液體MMN培養(yǎng)基。

所述培養(yǎng)的條件為：黑暗、27℃。

所述培養(yǎng)的條件為170r/min振蕩培養(yǎng)。

所述培養(yǎng)的過程中，第8天生物量達到最大。第6天生長率最快，生命力最強。

本發(fā)明還保護一種針A2-7的應用方法，包括如下步驟：先采用以上任一所述方法進行培養(yǎng)，然后2天內(nèi)將菌液運輸至目的地，以實現(xiàn)培養(yǎng)第8天將菌液用于植物種子浸種(以保證接菌效率)。

由于針A2-7具有重大的應用推廣價值，因此實際應用中涉及將針A2-7進行不同地域的運輸。考慮最佳生長率及最大生物量時間差，在培養(yǎng)至第6天開始運輸最佳。本發(fā)明為今后野外菌劑的運輸提供了依據(jù)。

運輸中建議按照如下規(guī)程進行操作：

(1)在培養(yǎng)針A2-7至第6天，菌的生命力最強時開始運輸最佳；

(2)運輸過程中，由于在途中的晃動過程仍是對菌液的一個培養(yǎng)過程，因此對于容器的選擇最好為扁形、大口徑容器，以便增加菌液與容器空氣的接觸面積；

(3)結(jié)合室內(nèi)菌液培養(yǎng)情況，容器需要留出一定的空間(總?cè)萜鞯?/3-1/2，以容器大小而定)，得以保證有一定的氧氣供應，使菌能夠繼續(xù)生長達到最大菌絲量；

(4)菌液運輸時間建議為10-12h，菌液運輸至目的地后，應在第8天前(從初始接種開始計的第8天前)接種于植物根際，保證其既具有活性較強又具有較高生物量。