[發明專利]一種檢測降壓類藥物中間體中基因毒性雜質的方法

有效

• 申請號: 202010199884.3
• 申請日: 2020-03-20
• 公開（公告）號: CN111307985B
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: 劉宇晶;利虔;趙小君;諶宗永
• 申請（專利權）人: 北京陽光諾和藥物研究有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種檢測降壓類藥物中間體中基因毒性雜質的方法，

所述基因毒性雜質包括3-硝基鄰苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯；

所述C1代表3-硝基-2-羧基苯甲酸甲酯；

所述C3代表2-[[(2'-氰基[1,1'-聯苯]-4-基)甲基][(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；

所述C4代表2-[[(2-氰基[1,1-聯苯]-4-基)甲基]氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯；

所述C5代表2-[[(2-氰基[1,1-聯苯]-4-基)甲基]氨基]-3-氨基苯甲酸甲酯；

所述3-硝基鄰苯二甲酸、C1、C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯的結構式如下所示：

；

所述方法包括以分析方法1檢測3-硝基鄰苯二甲酸和C1的操作和以分析方法2檢測C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯的操作；

其中，所述分析方法1包括：以3-硝基鄰苯二甲酸和C1作為對照品，采用高效液相色譜法檢測所述降壓類藥物中間體中是否含有3-硝基鄰苯二甲酸和C1以及按外標法以峰面積計算各雜質的含量；

所述分析方法2包括：以C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯作為對照品，采用高效液相色譜法檢測所述降壓類藥物中間體中是否含有C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯以及按外標法以峰面積計算C3、C4、C5和2-氰基-4-溴甲基聯苯雜質的含量；

所述降壓類藥物中間體為式II所示1-((2'-氰基-[1,1'-二苯基]-4-基)甲基)-2-乙氧基-1H-苯并[d]咪唑-7-羧酸乙酯；

式II

所述分析方法1中，使用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行高效液相色譜法檢測；其中，檢測波長為230nm；

所述高效液相色譜法中，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱；

以磷酸鹽緩沖溶液為流動相A記為A相，乙腈為流動相B記為B相；

流速為1.0±0.1ml/min；

柱溫為30±10℃；

梯度洗脫條件如下：

第0min起-10min末，所述A相與B相的體積比為80:20；

從第11min起-15min末，所述A相與B相的體積比由80:20變為35:65；

從第16min起至第24min末，所述A相與B相的體積比維持35:65；

從第25min起至第25.1min末，所述A相與B相的體積比由35:65變為80:20；

從第25.2min起至第35min末，所述A相與B相的體積比維持80:20；

所述分析方法2中，使用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行高效液相色譜法檢測；其中，檢測波長為230nm；

所述高效液相色譜法中，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱；

流動相為由體積比為40:60的磷酸鹽緩沖溶液和乙腈組成的混合液；

流速為1.0±0.1ml/min；

柱溫為30±10℃。

2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述分析方法1中，所述固定相的色譜柱為CAPCELL PAK C18 3μm 4.6×150mm色譜柱。

3. 根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述CAPCELL PAK C18 3μm 4.6×150mm色譜柱為CAPCELL PAK C18 MGⅡS-3 4.6×150mm 3μm色譜柱。