[發明專利]抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法及相應抗體的用途

在審

• 申請號: 202010198005.5
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111333721A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 王振華;楊鍇;崔一;陳淑芳;高欣召;王瑾
• 申請（專利權）人: 河北科星藥業有限公司
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C07K16/02;A61P31/20;A61P9/00
• 代理公司: 石家莊科誠專利事務所(普通合伙) 13113
• 代理人: 劉謨培;劉蘭芳

1.一種抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：該抗體的制備方法按照以下步驟順序進行：

S1.免疫抗原的制備

將檢測為心包積水綜合征的雞病料組織，按1∶3的重量體積比加入無菌生理鹽水，反復打磨混勻，得到混合液；將混合液置于冰箱中，反復凍融3次經過濾后得到的濾液進行離心，收集上清液并過濾、除菌，加入甲醛溶液滅活，得到免疫抗原；

S2.高免疫蛋的獲得

選取健康產蛋雞連續注射步驟S1中制得的免疫抗原，免疫三次，免疫間隔為14天，用量為1mL/只/次；完成第三次免疫7天后，經AGPT檢測血清抗體，滴度≥64，開始收集高免疫蛋；

S3.卵黃抗體的制備

分離高免疫蛋卵黃，倒入無菌容器內，按體積比1:5～1∶9加入無菌水稀釋卵黃液，充分攪拌，用鹽酸調pH值至5.0～6.5，繼續攪拌得到卵黃混合液；然后將卵黃混合液靜置4-5h或靜置過夜；之后收集卵黃混合液中的上清液，經超濾濃縮后得到濃縮液，之后在濃縮液中加入甲醛溶液，制得抗抗心包積水綜合征卵黃抗體。

2.根據權利要求1所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中的冰箱溫度為-80℃。

3.根據權利要求2所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中的離心轉速為12000rpm，離心時間為10min。

4.根據權利要求3所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中的甲醛溶液濃度為10%，濾液中加入10%甲醛溶液后的甲醛終濃度為0.1%。

5.根據權利要求1-4中任意一項所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S1中的滅活溫度為37℃，滅活時間為24h。

6.根據權利要求5所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中的鹽酸溶液濃度為10%。

7.根據權利要求1-4、6中任意一項所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中的甲醛溶液濃度為10%，濃縮液中加入10%甲醛溶液后的甲醛終濃度為0.1%。

8.根據權利要求5所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法，其特征在于：所述步驟S3中的甲醛溶液濃度為10%，濃縮液中加入10%甲醛溶液后的甲醛終濃度為0.1%。

9.抗心包積水綜合征卵黃抗體的一種用途，其特征在于：所述抗心包積水綜合征卵黃抗體為由權利要求1-9中任一項所述的抗心包積水綜合征卵黃抗體的制備方法制得，所述抗心包積水綜合征卵黃抗體用于制備預防和治療雞心包積水綜合征的藥物。