[發明專利]龍膽苦苷在逆轉肝癌細胞HepG2多藥耐藥中的應用

在審

• 申請號: 202010197195.9
• 申請日: 2020-03-19
• 公開（公告）號: CN111214479A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 王婷;喬曉賓;張敏;任娟;賀鈺婷
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;A61K31/513;A61K31/704;A61K33/243;A61P35/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

本發明公開了龍膽苦苷在逆轉肝癌細胞HepG2多藥耐藥中的應用，龍膽苦苷不僅可以抑制多藥耐藥肝癌細胞株HepG2R生長，而且可以作為化療增敏劑，增強HepG2R對氟尿嘧啶、阿霉素等化療藥物的敏感性，促進多藥耐藥肝癌細胞凋亡，根據逆轉細胞多藥耐藥的特性，龍膽苦苷可以用于制備腫瘤抑制劑。

技術領域

本發明涉及中藥有效成分龍膽苦苷作為腫瘤抑制劑和化療增敏劑的應用，具體涉及龍膽苦苷增強多藥耐藥肝癌細胞對氟尿嘧啶等化療藥物的敏感性，并誘導細胞凋亡的作用。

背景技術

肝癌是發生在肝臟的惡性腫瘤，包括原發性肝癌和轉移性肝癌，是嚴重威脅人們健康和生命的主要腫瘤之一。目前對于不能手術切除的中晚期肝癌患者，通常使用肝動脈介入栓塞化療，即通過動脈置管到達肝動脈，注入栓塞劑和/或化療藥物，從而控制腫瘤生長。其中常用的化療藥物主要包括：氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(AMD)、順鉑(DDP)和絲裂霉素(MMC)等。但隨著患者使用化療藥物的劑量與療程的增加，繼發腫瘤耐藥成為化療中面臨的主要難點。因此，尋找能抵抗耐藥性并誘導肝癌細胞凋亡的藥物是十分必要的。

從天然植物中尋找低毒、高效、價廉的抗癌活性成分具有廣闊的前景。龍膽苦苷(Gentiopicroside,Gen)是龍膽科多年生草本植物秦艽(Gentiana macrophylla)重要的次生代謝產物，屬于裂環環烯萜苷類化合物，分子式為C₁₆H₂₀O₉，分子量為356.32，CAS：20831-76-9。藥理研究證明，龍膽苦苷可以抑制血清中轉氨酶的活性，保護肝細胞膜，明顯降低多種急慢性肝損傷，減輕肝組織壞死、腫脹及脂肪變性的程度，促進肝臟的蛋白質合成。黃馨慧等研究表明10⁴nmol/L龍膽苦苷對SMMC-7721人肝癌細胞(表達HBsAg)具有殺傷效應，可抑制人肝癌細胞的增殖。趙忠偉等研究發現龍膽苦苷具有抑制人肝癌HepG2細胞作用，但半數抑制濃度(IC50)高于一般化療藥物。目前龍膽苦苷對多藥耐藥肝癌細胞的作用尚未見報道。

發明內容

本發明針對肝癌等實體腫瘤在化療中的獲得性耐藥問題，目的在于提供龍膽苦苷在逆轉肝癌細胞HepG2多藥耐藥中的應用。

為達到上述目的，本發明采用了以下技術方案：

龍膽苦苷在制備腫瘤抑制劑中的應用，所述龍膽苦苷為該腫瘤抑制劑中的化療藥物的增敏劑。

優選的，所述增敏是指提高腫瘤細胞對一種或多種化療藥物的敏感性，提高化療藥物對腫瘤細胞生長的抑制作用，通過增敏劑與化療藥物的聯合使用促進腫瘤細胞凋亡。

優選的，所述化療藥物選自氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(AMD)或順鉑(DDP)等。

優選的，所述腫瘤細胞選自多藥耐藥人肝癌細胞株HepG2R。

優選的，所述多藥耐藥人肝癌細胞株HepG2R是采用特定化療藥物(例如，氟尿嘧啶)進行篩選而得到的對多種化療藥物耐藥的人肝癌細胞株HepG2；通過MTT法檢測、計算半數抑制濃度(IC50)及耐藥指數(RI)，HepG2R與出發細胞株(HepG2)相比較，對化療藥物的RI≥2。

優選的，所述龍膽苦苷的添加濃度為50μg/mL～200μg/mL時，可以有效提高HepG2R細胞對氟尿嘧啶或阿霉素的敏感性，抑制HepG2R細胞的生長，促進HepG2R細胞凋亡。且超出該添加濃度范圍，則增敏作用的增加不明顯。

優選的，所述龍膽苦苷具有抑制HepG2R細胞生長，并促進HepG2R細胞凋亡的作用，龍膽苦苷對多藥耐藥人肝癌細胞株HepG2R的半數抑制濃度(IC50)為130.4μg/mL。

優選的，所述肝癌選自無乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人肝細胞癌。

本發明的有益效果體現在：