[發明專利]一種沼澤紅假單胞菌培養基及其應用

有效

• 申請號: 202010193826.X
• 申請日: 2020-03-18
• 公開（公告）號: CN111235071B
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發明（設計）人: 楊丹丹;吳文雷;徐澤平;張心青;楊傳倫;馬娜娜;張甲慶;陳振發;潘冬梅
• 申請（專利權）人: 黃河三角洲京博化工研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C02F3/34;C12R1/01;C02F103/20
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 趙斌;王增娣

1.一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，具體的制備步驟包括（1）菌種活化，（2）菌種培養，（3）擴大培養：

（1）菌種活化：將菌種接種在透光試管培養基中活化，接種量30-50%，光照強度3000-5000Lux，30-33℃恒溫密封培養3-5天，顏色由淺紅、紅、逐漸變為紅褐色即為培養成熟；

（2）種子培養：將步驟（1）活化好的菌種轉接到透光培養容器進行培養，接種量30-50%，光照強度3000-5000Lux，30-33℃恒溫密封培養2-4天，顏色由淺紅、紅、逐漸變為紅褐色即為培養成熟，得到種子液；

（3）擴大培養：將種子液接種到更大的培養容器中，接種量10-30%，培養條件：光照強度3000-5000 Lux，控制溫度30-33℃，密封培養5-7天；

所采用的沼澤紅假單胞菌培養基，其組成和配方為：檸檬酸0.75-1.25g/L，牛肉膏1.50-3.00g/L，酵母膏0.42-0.62g/L，蛋白胨1.50-2.00g/L，乙酸鈉0.40-0.60g/L，硫酸鎂0.25-0.50g/L，硫酸亞鐵5.00-8.00mg/L，VB₆ 0.15-0.2mg/L，氯化鈣0.10-0.30g/L，磷酸二氫鉀0.10-0.25g/L，復合無機鹽溶液0.5-1.0mL/L，溶劑為水，調節pH至6.8-7.0；

所述的復合無機鹽溶液由以下組分組成：EDTA 0.5g/L，硫酸鋅0.01g/L，硼酸0.03g/L，氯化錳0.003g/L，氯化鈣0.02g/L，氯化銅0.001g/L，鉬酸鈉0.003g/L，溶劑為水。

2.根據權利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，沼澤紅假單胞菌培養基采用質量濃度為20%的氫氧化鈉或氫氧化鉀調節pH。

3.根據權利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，培養基組分中的磷酸二氫鉀、復合物無機鹽溶液需要進行單獨滅菌。

4.根據權利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，步驟（1）菌種活化培養期間每天應搖晃轉動試管至少1次。

5.根據權利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，步驟（1）菌種活化中試管總裝液量為90%。

6.根據權利要求1所述的一種沼澤紅假單胞菌菌劑的培養方法，其特征在于，所有培養容器均采用化學滅菌法，具體為0.5‰次氯酸鈉水溶液浸泡12-24小時或用75%酒精涮洗2遍；培養基中磷酸二氫鉀、復合物無機鹽溶液、其他剩余組分采用115℃，10min滅菌。