[發(fā)明專利]一種以人復(fù)制缺陷腺病毒為載體的重組新型冠狀病毒疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010193587.8
• 申請日: 2020-03-18
• 公開（公告）號: CN111218459B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳薇;吳詩坡;侯利華;張哲;王步森;郭強;張金龍;宋小紅;付玲;張軍;陳旖;趙拯浩;朱濤;李藎;莘春林
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫(yī)學研究院;康希諾生物股份公司
• 主分類號: C12N15/50
• 分類號: C12N15/50;C07K14/165;C12N15/861;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 北京市眾天律師事務(wù)所 11478
• 代理人: 李新軍

1.一種編碼2019新型冠狀病毒S蛋白的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一種含有權(quán)利要求1所述多核苷酸的載體。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的載體，其特征在于，所述載體為pDC316。

4.一種表達權(quán)利要求1所述多核苷酸的人復(fù)制缺陷重組腺病毒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組腺病毒，其特征在于，所述重組腺病毒來源于AdMax腺病毒系統(tǒng)。

6.權(quán)利要求4或5所述重組腺病毒在制備預(yù)防2019新型冠狀病毒疫苗中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述重組腺病毒被制備為注射劑、滴鼻劑或噴霧劑。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述重組腺病毒被制備為肌肉注射劑。

9.一種制備權(quán)利要求4或5所述的重組腺病毒的方法，所述方法包括以下步驟：

(1)構(gòu)建含有編碼2019新型冠狀病毒S蛋白的多核苷酸的穿梭質(zhì)粒載體；

(2)將步驟(1)所述穿梭質(zhì)粒載體與骨架質(zhì)粒一起轉(zhuǎn)染入宿主細胞；

(3)培養(yǎng)步驟(2)所述宿主細胞；

(4)收獲從步驟(3)所述細胞中釋放的人復(fù)制缺陷重組腺病毒；

(5)對步聚(4)中的重組腺病毒進行擴大培養(yǎng)；

(6)對步聚(5)中的培養(yǎng)產(chǎn)物進行純化。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述載體為pDC316。

11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(2)所述骨架質(zhì)粒為pBHGlox_E1,3Cre。

12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述細胞為HEK293細胞。

13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(5)所述擴大培養(yǎng)方法為懸浮培養(yǎng)。

14.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(6)所述純化方法為Source 30Q層析法。