[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010189352.1
• 申請(qǐng)日: 2020-03-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111375361B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭學(xué)鋒;曹毓琳;騰睿頔;嚴(yán)詠;王穎;賀偉;白志惠;趙宇紅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京唐頤惠康生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司;南京大學(xué);北京臻溪谷醫(yī)學(xué)研究中心（有限合伙）
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/00
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/00
• 代理公司: 北京卓愛(ài)普專(zhuān)利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11920
• 代理人: 王玉松;宋丹丹

1.一種用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，所述3D微膠囊的制備方法包括以下步驟：

(1)將重量百分比為1-6wt％的海藻酸鈉溶液與重量百分比為0.1-5wt％的明膠溶液以0.1-2:0.1-2的比例混合均勻，制得第一混合溶液；

(2)在所述第一混合溶液中加入起泡劑混合均勻，所述起泡劑在所述第一混合溶液中的濃度為5-100g/L，制得第二混合溶液；

(3)在所述第二混合溶液中滴加CaCl₂溶液，所述CaCl₂溶液與所述第一混合溶液的體積比為1-2:1-2，制得微膠囊溶液；

(4)將所述微膠囊溶液用生理鹽水洗滌3-6次，再進(jìn)行真空干燥，制得干燥微膠囊；

(5)將所述干燥微膠囊壓扁、滅菌，即得3D微膠囊。

2.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，步驟(5)所述的將所述干燥微膠囊壓扁是通過(guò)機(jī)械壓扁的方法將所述干燥微膠囊壓扁。

3.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，步驟(5)所述的將所述干燥微膠囊壓扁、滅菌是采用放射性同位素放射的γ射線殺滅微生物和芽孢，其中，輻射滅菌劑量為25000Gy。

4.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，所述起泡劑包括氨基酸起泡劑、椰油起泡劑、檸檬酸、檸檬酸鈉、碳酸鈉和碳酸氫鈉中的一種。

5.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，步驟(3)的CaCl₂溶液的滴加速度為5-10s/d。

6.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，步驟(3)的CaCl₂溶液的滴加速度為10s/d。

7.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，步驟(3)的CaCl₂溶液滴加前保持第二混合溶液的氣泡大小穩(wěn)定。

8.如權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊，其特征在于，所述CaCl₂溶液的濃度為0.1-0.6mol/L。

9.一種應(yīng)用于權(quán)利要求1所述的3D微膠囊的解囊劑，其特征在于，所述解囊劑包括質(zhì)量比為0.1-1.0:0.1-2.0:0.1-1.0:0.1-2.0的氨基酸+檸檬酸+檸檬酸鈉+EDTA鈉鹽，所述氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、絲氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸和組氨酸中的任意一種。

10.一種權(quán)利要求1所述的用于大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)的納米海藻糖3D微膠囊的應(yīng)用，其特征在于，所述3D微膠囊用于三維培養(yǎng)大規(guī)模的干細(xì)胞。