[發明專利]一種用于光動力治療的細菌載體及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202010188454.1
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN113398275B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 陳卓;戴濤;胡萍;潘小宏;陳錦燦;張蕾
• 申請（專利權）人: 中國科學院福建物質結構研究所
• 主分類號: A61K47/46
• 分類號: A61K47/46;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 聶稻波;梁田

本發明公開了一種用于光動力治療的細菌載體及其制備方法與應用，采用非致病性大腸桿菌作為載體，負載光敏劑，結合光動力治療法，實現對于腫瘤的光動力治療，實現了光敏劑的遞送，顯著提高了腫瘤細胞對光敏劑的攝取量，增加了病灶對于光動力療法的敏感度，可顯著改善治療效果，生物安全性好。

技術領域

本發明涉及細菌載藥領域，更具體地說涉及一種用于光動力治療的細菌載體及其制備方法與應用。

背景技術

自100多年前Coley發現細菌能夠治療腫瘤以來，細菌治療腫瘤已經成為近年的研究的熱點，并取得突破性進展。細菌對腫瘤趨化性機制的假設可以總結為三點：(1)腫瘤部位所造成的免疫逃脫機制為細菌提供了一個庇護所；(2)腫瘤及其周圍組織偏酸性的環境適宜細菌生長；(3)腫瘤部位的缺氧環境以及核心壞死區域，這些條件都為細菌提供了理想生存環境。目前大多數對于細菌療法的研究在于基因改造層面，細菌基因改造操作簡單，在預臨床的研究中效果顯著，但其也存在缺點，一般細菌在腫瘤部位存留時間不超過15天，工程菌在腫瘤位置表達蛋白的量不能有效抑制腫瘤生長。因此，細菌療法通常作為對基因治療腫瘤方法的一種補充。

能夠在腫瘤內部積累的細菌種類有很多，目前發現有十幾種細菌對于小鼠腫瘤模型有效。其中多數細菌為致病菌，通過突變musB基因來改變脂多糖(LPS)的結構，從而消除或減弱其致病性，避免由細菌引起的敗血癥，在預臨床實驗中取得了良好的抗腫瘤效果，但其給藥的細菌數量依然偏低。非致病的大腸桿菌DH5α具有良好的生物安全性，由于其能夠大劑量靜脈注射到小鼠體內而不造成死亡，故其可作為藥物載體。

光動力治療(PDT)在腫瘤治療中具有快速、高效、低毒等特點，已被美國食品藥品監督管理局批準用于特定的腫瘤治療。酞菁型光敏劑被廣泛用于抗腫瘤的研究中，酞菁型化合物在近紅外波段的光照射下，會產生單線態氧和相關的活性氧(ROS)對其周圍的組織和細胞進行殺傷，在預臨床研究中取得良好的抗腫瘤效果。目前對酞菁的研究多停留在酞菁分子的改造上，修飾靶向基團靶向特定腫瘤，但這些靶向性光敏劑往往起不到很好的治療作用，主要原因是腫瘤對藥物的排斥性使得藥物進入不到腫瘤內部，極大降低了藥物的效果。

發明內容

本發明目的在于提供細菌載體及其制備方法和應用。

為了實現本發明的目的，采用如下技術方案：

本發明提供了非致病性大腸桿菌作為光動力治療用的光敏劑載體的應用。

根據本發明的實施方案，所述光敏劑為本領域已知的光動力治療用光敏劑，例如酞菁型光敏劑、亞芐基環烷烴酮光敏劑、玫瑰紅(rose?bengal)、錫乙基初紅紫素、血卟啉或5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽等；優選酞菁型光敏劑。

本發明還提供一種細菌載體，包括大腸桿菌和光敏劑，所述光敏劑負載于大腸桿菌。

根據本發明的實施方案，所述大腸桿菌為非致病性大腸桿菌，例如為大腸桿菌DH5α。

根據本發明的實施方案，所述大腸桿菌和光敏劑的負載比例沒有特別的限定，本領域技術人員可以根據光動力治療所需有效量的光敏劑確定大腸桿菌的濃度，例如，10⁹CFU/ml的大腸桿菌所負載的光敏劑飽和濃度為100μM的光敏劑。在一個實施方案中，每10⁵CFU/ml的大腸桿菌負載光敏劑的濃度為1-25μM。

根據本發明的實施方案，所述光敏劑為本領已知的光動力治療用光敏劑，例如酞菁型光敏劑、亞芐基環烷烴酮光敏劑、玫瑰紅(rose?bengal)、錫乙基初紅紫素、血卟啉或5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽等；優選酞菁型光敏劑。在一個具體實施方案中，所述酞菁型光敏劑為式I所示的化合物：

本發明進一步提供上述細菌載體的制備方法，包括如下步驟：

(1)活化大腸桿菌，配制大腸桿菌懸浮液；