[發(fā)明專利]用于診斷和治療肝癌的miRNA的標志物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010188092.6
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111172289B
• 公開（公告）日: 2020-11-10
• 發(fā)明（設計）人: 趙鑫;張穎;曹經(jīng)琳;劉文鵬;劉寶旺;崔自強;曾強;王洋;滕亮;張軍紅;高慶軍;竇劍
• 申請（專利權）人: 河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 孟祥斌

本發(fā)明公開了用于診斷和治療肝癌的miRNA的標志物，本發(fā)明記載了miR?4326在肝癌中表達上調，通過在TCGA中驗證miR?4326，發(fā)現(xiàn)其具有較高的診斷效能。本發(fā)明同時記載了miR?4326的抑制劑可以降低肝癌細胞增殖活性，降低細胞的穿膜數(shù)，提示miR?4326可應用于肝癌的診斷和治療。

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及用于診斷和治療肝癌的miRNA的標志物。

背景技術

原發(fā)性肝癌(HCC)在我國癌癥發(fā)生率中位列第四，居惡性腫瘤導致人類死亡的第二位。由于缺乏明確的早期診斷標志物、特異性的臨床癥狀等，肝癌患者確診時通常已是晚期，大多數(shù)患者失去了手術機會，總的5年生存期很短。因此，研究影響肝癌的誘發(fā)因素及侵襲和轉移的過程，進而研發(fā)肝癌治療藥物是現(xiàn)在研究重點。

MicroRNA(miRNA)是一類高度保守的長度為21-25nt的單鏈內源性非編碼RNA小分子片段，miRNA的轉錄主要在細胞核內由聚合酶II催化進行，主要步驟如下：轉錄起始階段，miRNA在聚合酶II的作用下轉變?yōu)槠鹗糾iRNA(Primary miRNA,Pri-miRNA)。在RNA酶III的作用下，Pri-miRNA在自身結構的先導區(qū)形成一個或多個發(fā)卡結構，此時的miRNA稱為Pre-miRNA。Pre-miRNA由一系列特殊的內源性酶，如Drosha，Dicer，Argonaute等，分割成小段；然后，部分或者完全結合到目標基因的信使RNA(mRNA)的3'-UTR區(qū)域，進一步導致目標基因的表達水平降低或者升高通過降解mRNA或者抑制mRNA的轉錄后翻譯階段(He L,Thomson JM,Hemann M T,et al.A microRNA polycistron as a potential human oncogene[J].Nature,2005,435(7043):828-833.)。miRNA不編碼蛋白，只通過影響目標蛋白的轉錄或翻譯來改變基因的表達水平。在這個調控蛋白表達的過程中，miRNA能夠參與細胞內的各種生物學過程，如細胞的增殖，分化及凋亡。目前人類已發(fā)現(xiàn)并給予證明的miRNA多達2500個左右，人體內約三分之一以上的基因被其翻譯和調控。隨著對miRNA的進一步深入研究，人類發(fā)現(xiàn)在肝癌整個發(fā)展進程期間，對miRNA調控目標基因進而影響肝癌的發(fā)展的基礎研究不斷增多。

近年來，越來越多的上游調控基因被發(fā)現(xiàn)與腫瘤的轉移具有較大的相關性，在腫瘤細胞侵襲轉移的過程中發(fā)揮著非常關鍵的作用。而且，研究發(fā)現(xiàn)miRNA在肝細胞增殖及分化、細胞骨架重排及凋亡等多個方面在細胞層面起到重要調節(jié)作用，進而誘導機體出現(xiàn)一系列的病理、生理改變。因此研究與肝癌相關的miRNA標志物有利于揭示肝癌的發(fā)病機理以及實現(xiàn)臨床診斷和治療。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種用于肝癌診斷和治療的生物標志物。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術方案：

本發(fā)明提供了檢測miR-4326的試劑在制備診斷肝癌的產品中的應用，所述miR-4326選自以下組中的至少一種：miR-4326初始miRNA、miR-4326前體miRNA、成熟miR-4326；所述miR-4326初始miRNA能在人細胞內被剪切并表達成熟miR-4326；所述miR-4326前體miRNA能在人細胞內被剪切并表達成熟miR-4326。

進一步，所述miR-4326為成熟miR-4326。

進一步，所述產品包括通過使用qRT-PCR、印記雜交、原位雜交、陣列雜交、基因芯片或新一代測序來檢測miR-4326或其同源物的水平的試劑。

本發(fā)明提供了一種診斷肝癌的產品，所述產品包括檢測miR-4326的試劑。

進一步，所述產品包括芯片、陣列或試劑盒。

進一步，所述試劑包括針對miR-4326的引物和/或探針。