[發明專利]一種頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法

在審

• 申請號: 202010187247.4
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111366647A
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: 魏守輝;鐘源;郁繼華;肖雪梅;魏麗娟;柳帆紅;頡博杰;劉曉奇
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京知呱呱知識產權代理有限公司 11577
• 代理人: 盛明星

1.一種頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)樣品前處理：將存放在液氮中的甘藍葉片樣品取出后迅速研磨至勻漿狀態，稱取1.0～3.5g勻漿置于頂空瓶中，加入0.3～0.5μg內標物2-辛醇，密封瓶口；

(2)頂空固相微萃取：將內裝有樣品的頂空瓶在50～70℃平衡10～20min，然后將SPME針管插入頂空瓶內，推出萃取頭，并使萃取頭處于樣品之上，再次萃取30～40min，萃取完立即將萃取頭插入到氣相色譜-質譜聯用儀進樣口，250℃解析3～5min；

(3)氣相色譜-質譜聯用：對甘藍葉片揮發性成分進行定性和定量分析。

2.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，在密封瓶口之前，向所述頂空瓶中加入1～3ml超純水和0.5～1.5g氯化鈉。

3.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，在密封瓶口之前，所述頂空瓶內裝有磁力攪拌轉子，將頂空瓶置于恒溫金屬磁力攪拌器上進行平衡。

4.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，所述氣相色譜條件：

色譜柱：DB-WAX彈性石英毛細管柱，30m×0.25mm，0.25μm；進樣口溫度：250℃；載氣：純度≥99.999％的高純氦氣，柱流速1.0mL/min；進樣方式：不分流進樣；程序升溫：初始溫度40℃，保持5min，以5℃/min升溫至100℃，再以8℃/min升溫至150℃，最后以10℃/min升溫至210℃，保持5min。

5.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，所述質譜條件：

電離方式：電子電離(EI)；電子能量：70eV；離子源溫度：230℃；檢測器溫度：250℃；掃描方式：全掃描；掃描質量范圍m/z：33～500amu；四級桿溫度：180℃。

6.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，所述萃取頭為50/30μm DVB/CAR/PDMS固相微萃取頭，且使用之前在250℃條件下老化1h。

7.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，甘藍葉片揮發性成分的定性分析經計算機質譜工作站的自動解卷積系統(AMDIS)和標準質譜庫(NIST 14)對照分析完成。

8.根據權利要求1所述的頂空固相微萃取結合氣相色譜-質譜聯用檢測甘藍葉片揮發性成分的方法，其特征在于，甘藍葉片揮發性成分的定量分析采用內標物定量分析法，計算公式如下：

揮發性物質含量/(μg/kg)＝(A₁/A₂)×(M₁/M₂)×1000，式中：A₁為待測物質峰面積；A₂為內標物峰面積；M₁為內標物質量/μg；M₂為樣品質量/g。