[發明專利]一種水稻矮化、多分蘗基因Os11g0587000突變體及其應用在審
| 申請號: | 202010185814.2 | 申請日: | 2020-03-17 |
| 公開(公告)號: | CN111378672A | 公開(公告)日: | 2020-07-07 |
| 發明(設計)人: | 林智敏;顏靜宛;王鋒;蘇軍;宋亞娜 | 申請(專利權)人: | 福建省農業科學院生物技術研究所 |
| 主分類號: | C12N15/29 | 分類號: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司: | 福州元創專利商標代理有限公司 35100 | 代理人: | 饒文君;蔡學俊 |
| 地址: | 350003 福*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 水稻 矮化 分蘗 基因 os11g0587000 突變體 及其 應用 | ||
1.一種水稻矮化、多分蘗基因Os11g0587000突變體,其特征在于,所述突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.權利要求1所述的水稻矮化、多分蘗基因Os11g0587000突變體編碼的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;或該序列經替換、缺失或添加個或幾個氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。
3.權利要求1所述水稻矮化、多蘗基因Os11g0587000突變體的創制方法,其特征在于:包括以下步驟:
(1) RNA靶點序列設計:根據水稻水稻矮化、多分蘗基因Os11g0587000的基因組序列和CRISP/Cas9技術的設計靶位點的原則,設計1個引導RNA靶點序列,其序列為5’-CATCTCAAGAATCTTCAGTC -3’;
(2)CRISPR/Cas9-gRNA載體的構建:
(3)農桿菌介導水稻愈傷組織遺傳轉化:把步驟(2)構建好的CRISPR/Cas9-gRNA載體轉化到水稻品種明恢86中,獲得了不含有CRISPR元件T-DNA成分的純合Os11g0587000基因突變體。
4.根據權利要求3所述所述水稻矮化、多蘗基因Os11g0587000突變體的創制方法,其特征在于:所述步驟(1)中,靶位點設計在基因的第一個外顯子上;所述的引導RNA靶點序列的寡核苷酸序列為:
D86F:5'-cag :CATCTCAAGAATCTTCAGTC-3';
D86R:5'-aac :GACTGAAGATTCTTGAGATG -3'。
5.一種水稻矮化、多分蘗基因Os11g0587000突變體植株,其特征在于:是通過將權利要求3所述的靶點CRISPR/Cas9-sgRNA載體轉化入水稻成熟胚愈傷組織,獲得轉基因陽性植株。
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