[發(fā)明專利]一種精確檢測含葡萄糖基團的多糖中旋光異構(gòu)體比例的方法及裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010185582.0
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111366538B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 譚淞文;王博;向佳;張廣海;何書鍵
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇道寧藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N21/21
• 分類號: G01N21/21;G01N21/03
• 代理公司: 常州國洸專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32467
• 代理人: 林大偉

本發(fā)明屬于旋光異構(gòu)體比例的檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種精確檢測含葡萄糖基團的多糖中旋光異構(gòu)體比例的方法及裝置。基于待測樣品在某種有機溶劑中不發(fā)生變旋，但在水相中會完成α到β或β到α的變旋，先對待測樣品在有機溶劑和水相中的旋光度進行檢測，再通過對比計算得出該待測樣品中精確的α:β比例。本發(fā)明在不通過液相分離α、β異構(gòu)體的前提下，能準確、簡便地測得α:β比例，且不需要對待測樣品進行水份測定或預(yù)處理。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于旋光異構(gòu)體比例的檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種精確檢測含葡萄糖基團的多糖中旋光異構(gòu)體比例的方法及裝置。

背景技術(shù)

由于不同構(gòu)型的多糖具有不同的物理性質(zhì)，包括溶出速率、崩解時限等，這種差異在應(yīng)用于制藥工藝時具有非常重要的意義：例如對多糖旋光異構(gòu)體的研究，能精確掌握旋光異構(gòu)體比例，有助于深入探知不同構(gòu)型比例的多糖在藥物崩解、溶出乃至被人體吸收時的速率，可以根據(jù)臨床實際需求精確調(diào)整不同的構(gòu)型比例，使藥物達到最好的治療效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種精確檢測含葡萄糖基團的多糖中旋光異構(gòu)體比例的方法：將待測的分子結(jié)構(gòu)中含葡萄糖基團的多糖樣品分為兩份，一份充分分散于有機溶劑中，另一份充分分散于水中，分別測出所得的溶解有多糖的有機溶劑的旋光度A1以及所得的溶解有多糖的水體的旋光度A2，再計算出該多糖樣品中不同構(gòu)型的旋光異構(gòu)體的占比，

首先，旋光度的測量與樣品溶于溶劑中的濃度有關(guān)，但是樣品本身存在一個“純度”問題，即樣品一般都是不純的，多糖樣品中不可避免含有水分(如結(jié)晶水、自由水)，因此稱量到的樣品重量不是目標物的實際重量，如果直接將稱量值作為目標物的實際重量來參與計算，必然影響檢測的準確性，為了解決這一問題，人們一般都是事先對多糖樣品進行脫水預(yù)處理或進行水份測定，不僅增加了操作工序，而且脫水預(yù)處理需要借助高溫，會導致多糖樣品部分焦化或被氧化，帶來了新的誤差，

對此，本方案的檢測方法中無需對多糖樣品進行水份測定或脫水預(yù)處理，也能解決上述的“樣品中含水分”的問題：

以乳糖為例，乳糖在水相中會發(fā)生α構(gòu)型到β構(gòu)型或β構(gòu)型到α構(gòu)型的變旋，并且乳糖分散于水相中后，無論樣品中α構(gòu)型與β構(gòu)型之間的初始比例如何，最終都能達到β構(gòu)型與α構(gòu)型之間的質(zhì)量比約為6：4的動態(tài)平衡(受到溫度等因素的影響，“6：4”這個值會發(fā)生微小的浮動，“6：4”是常溫25℃下動態(tài)平衡時的比例值)，因此本方案中先根據(jù)多糖樣品于水相中充分分散、變旋后被測到的旋光度A2、以及多糖樣品于水相中充分變旋后β構(gòu)型與α構(gòu)型之間的質(zhì)量比為6：4的這個比例值，先列出一個等式：

A2＝(89×0.4+35×0.6)×K?(式1)

其中，“89”和“35”分別為純的α構(gòu)型和純的β構(gòu)型的比旋度，而更重要的是：這里所得到的影響系數(shù)K除了涉及從“比旋度”到“旋光度”的常規(guī)換算系數(shù)(如測試儀器的規(guī)格、測試參數(shù)等)外，還涉及到“由于樣品中含有水分，從而導致了樣品分散于溶劑中的實際濃度與投料時預(yù)期濃度不同”這一影響，將這些影響因素整合成K這一系數(shù)；

另一方面，本方案中檢測溶解有乳糖的有機溶劑的旋光度A1：

申請人發(fā)現(xiàn)：雖然乳糖在水相中會發(fā)生變旋，但是乳糖在一些有機溶劑中是不發(fā)生變旋的，申請人在眾多有機溶劑中選擇DMSO，不僅是因為發(fā)現(xiàn)乳糖在DMSO中不發(fā)生變旋，同時，乳糖在很多有機溶劑中不溶解或溶解度極低，因此無法有效測得旋光度，但申請人發(fā)現(xiàn)，乳糖在常溫下能溶解在DMSO中并可形成接近0.5g/mL的穩(wěn)定溶液，