[發明專利]一種快速測定珠芽蓼中綠原酸同分異構體的方法及應用

在審

• 申請號: 202010184923.2
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111189951A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 錢正明;李春紅;謝美霞;張林杰;豐其娥
• 申請（專利權）人: 東莞市東陽光冬蟲夏草研發有限公司;宜昌山城水都冬蟲夏草有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速測定珠芽蓼中綠原酸同分異構體的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)供試品溶液的制備：采用50％甲醇提取珠芽蓼制備供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：

綠原酸對照品溶液：取綠原酸加甲醇制成綠原酸對照品溶液；

新綠原酸對照品溶液：取新綠原酸加甲醇制成新綠原酸對照品溶液；

隱綠原酸對照品溶液：取隱綠原酸加甲醇制成隱綠原酸對照品溶液；

混合對照品溶液：取綠原酸、新綠原酸和隱綠原酸的對照品加甲醇制成綠原酸、新綠原酸和隱綠原酸的混合對照品溶液；

(3)將步驟(1)中的供試品溶液和步驟(2)中的對照品溶液按照以下高效液相色譜分析檢測條件進行檢測分析：C18色譜柱，流動相0.1％乙酸(A)-甲醇(B)，梯度洗脫，流速0.8～1.5mL/min；柱溫25～35℃；檢測波長330nm。

2.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備步驟包括：采用50％甲醇超聲或渦旋提取珠芽蓼，離心，取上清液過濾即得供試品溶液。

3.根據權利要求1～2任一項所述的測定方法，其特征在于，所述珠芽蓼與所述50％甲醇的料液比為1:10～1:50g/mL，優選1:30g/mL。

4.根據權利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述超聲的時間為1～45min，優選1～5min，更優選5min；

所述渦旋的時間為1～5min，優選3～5min，更優選5min。

5.根據權利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述離心時間為3-10min，優選5min；所述離心轉速為3000-8000rpm/min，優選5000rpm/min。

6.根據權利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備步驟包括：所述珠芽蓼為珠芽蓼根莖，精密稱定過3號篩的珠芽蓼根莖粉末0.25g在7.5mL的50％甲醇中超聲或渦旋提取5min，取出放冷，稱定重量，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，5000rpm/min離心5min，取上清液過0.22μm有機濾膜，取續濾液，即得供試品溶液。

7.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述C18色譜柱為Agilent PoroShell120 EC-C18(50mm×4.6mm，2.7μm)或者Agilent ZORBAX SB-C18(150mm×4.6mm，5μm)，優選Agilent PoroShell 120EC-C18(50mm×4.6mm，2.7μm)。

8.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述C18色譜柱為Agilent PoroShell120 EC-C18(50mm×4.6mm，2.7μm)，流速1mL·min^-1，柱溫35℃，梯度洗脫條件如下：

0-12min，B由10％升至11％～15％；或

0-7min，B由10％升至11％～15％，7-12min，B由11％～15％升至100％；

優選0-7min，B由10％升至13％，7-12min，B由13％升至100％。

9.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述C18色譜柱為Agilent PoroShell120 EC-C18(50mm×4.6mm，2.7μm)；梯度洗脫條件為：0-7min，B由10％升至13％，7-12min，B由13％升至100％；流速0.8～1.5mL·min^-1；柱溫35℃；檢測波長330nm；進樣量1～2.5μL，優選地，進樣量為2μL。

10.權利要求1～9任意一項所述的方法在鑒定珠芽蓼中同分異構體或測定珠芽蓼中同分異構體含量中的應用。