[發明專利]一種脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202010184847.5
• 申請日: 2020-03-17
• 公開（公告）號: CN111175242A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 汪媛媛;薛原楷
• 申請（專利權）人: 湖南新大陸生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/75
• 代理公司: 福州市景弘專利代理事務所(普通合伙) 35219
• 代理人: 林祥翔;黃以琳

本發明公開了一種脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒及其應用，屬于生物化學技術領域。所述的試劑盒包括R1和R2雙試劑，用于測定脂蛋白磷脂酶A2的活性。本試劑盒穩定性好，使用前無需配制，且有效期長，可用于冠心病或腦卒中等不良心血管事件的風險的預測，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物化學技術領域，具體涉及一種脂蛋白磷脂酶A2活性的檢測試劑盒，以及在臨床檢測中的應用。

背景技術

脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)是絲氨酸依賴的磷脂酶，屬于磷脂酶家族，由441個氨基酸組成，主要由炎癥細胞(如巨噬細胞、淋巴細胞等)分泌。研究證明，Lp-PLA2在心血管疾病檢測方面具有重要意義：①Lp-PLA2是血管炎癥特異性標志物，其含量增加可以提示心血管疾病風險性的增加；②各種動脈粥樣硬化相關的心腦血管栓塞性疾病的風險評估，包括腦卒中、冠心病等不良心血管事件的風險評估；③各種動脈粥樣硬化相關的心腦血管栓塞性疾病治療效果評估。

目前，對于Lp-PLA2的檢測主要是利用免疫學上抗原-抗體的反應原理，測定Lp-PLA2的質量，并不能確定其中Lp-PLA2的酶活。有研究顯示，Lp-PLA2促動脈粥樣硬化的作用來源于其酶活而不是質量。對于Lp-PLA2發生氨基酸突變的人群，如果突變的氨基酸影響了Lp-PLA2的酶活，那么質量檢測與酶活檢測結果就不一致，因而可能與臨床不符。所以，臨床上需要對Lp-PLA2的活性進行檢測。雖然市面上已有Lp-PLA2活性檢測的試劑，但是試劑的穩定性差，在使用前需現配現用，不便于臨床使用。

發明內容

為此，需要提供一種快速、方便、穩定的脂蛋白磷脂酶A2活性檢測試劑盒，便于臨床推廣使用。

本發明提供的技術方案如下：

一種脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒，所述的試劑盒包括R1和R2雙試劑；其中R1試劑的成分包括4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液；R2試劑的成分包括1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰膽堿、1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰乙醇胺、1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰甘油或1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷酸，其中的一種以上。

進一步的，所述的R1試劑的配方為4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)100-150mM，NaCl0.8-1.0％，EDTA·Na25-10mM，pH 7.4-7.6。

所述的R2試劑的配方為檸檬酸20-30mM，NaCl 0.8-1.0％，EDTA·Na2 5-10mM，3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽(CHAPS)5-10mM，正壬烷磺酸鈉5-10mM，pH2.4-2.6，1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰膽堿(DNGP)15-25mM，二甲基亞砜(DMSO)30-40％。

進一步的，所述的脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒在檢測血液中脂蛋白磷脂酶A2活性中的應用。

進一步的，所述的脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒在預測冠心病或腦卒中風險中的應用。

區別于現有技術，上述技術方案的有益效果在于：本試劑盒測定脂蛋白磷脂酶A2的活性，且為雙試劑，穩定性好，使用前無需配制，即開即用。本試劑盒可以在全自動生化分析儀上使用，有效期長，可達12個月。本試劑盒可用于冠心病或腦卒中等不良心血管事件風險的評估。

具體實施方式

為詳細說明技術方案的技術內容、所實現目的及效果，以下結合具體實施例詳予說明。

實施例1