[發明專利]基因組工程化的方法和組合物

在審

• 申請號: 202010184376.8
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN111330021A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: J·C·米勒;D·帕斯喬恩;E·J·瑞巴;T·韋克斯勒;張雷
• 申請（專利權）人: 桑格摩生物科學股份有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P7/06;C12N9/22;C12N15/55;C12N15/864
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉

1.一種藥物組合物，包含：

(a)包含編碼治療性蛋白的轉基因的表達載體；

(b)編碼一ZFN對的左側鋅指核酸酶ZFN的表達載體；和

(c)編碼一ZFN對的右側鋅指核酸酶ZFN的表達載體；

其中左側和右側ZFN各自包含野生型或工程化裂解結構域或裂解半結構域，以及稱為并且排序為F1至F5或F1至F6的五個或六個鋅指結構域，五個或六個鋅指結構域中的每一個包含一個鋅指識別螺旋區，所述識別螺旋區如下所示：

(i)SBS#47171的F1至F5的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:23,18,24,20和21組成；

(ii)SBS#47898的F1至F6的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:14,28,25,15,16和12組成；

(iii)SBS#47079或SBS#47169的F1至F6的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:14,9,10,15,16和12組成；

(iv)SBS#47931的F1至F6的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:14,9,25,15,16和12組成；

(v)SBS#47863的F1至F5的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:2,26,24,20,和27組成；或

(vi)SBS#47192的F1至F5的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:2,26,24,20和21組成,

(viii)SBS#40477的F1至F6的鋅指識別螺旋區，其依次分別由SEQ ID NO:8,114,11,126和12組成,

其中左ZFN包括選自(i)、(v)、(vi)和(vii)的鋅指識別螺旋區，右ZFN包括選自(ii)、(iii)、(iv)和(viii)的鋅指識別螺旋區。

2.如權利要求1所述的鋅指蛋白核酸酶對，其中左ZFN包括(i)的鋅指識別螺旋區，右ZFN包含(ii)的鋅指識別螺旋區。

3.如權利要求1或2所述的藥物組合物，其中載體是AAV載體。

4.如權利要求3所述的藥物組合物，其中AAV載體是AAV2/8載體。

5.權利要求1-4任一所述的藥物組合物的用途，用于制備治療轉基因編碼的治療蛋白缺少或有缺陷的患者的藥物。

6.如權利要求5所述的用途，其中患者具有溶酶體貯積病。

7.如權利要求5或6所述的用途，其中藥物組合物靜脈內施用。

8.一種用于在白蛋白基因中整合治療性蛋白的試劑盒，其包括如權利要求1至4中任一項所述的藥物組合物。

9.如權利要求5-7任一所述的用途，其中藥物組合物在患者中不引起免疫應答。

10.如權利要求1所述的組合物，其中ZFN對誘導8.2％-17.2％的細胞切割。

11.如權利要求1所述的組合物，其中轉基因表達蛋白質的量比正常表達水平高至少50％。