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[發明專利]一種基于LC-MS同時測定多種神經遞質的人血清測定方法有效

專利信息
申請號: 202010183512.1 申請日: 2020-03-16
公開(公告)號: CN111337609B 公開(公告)日: 2023-03-21
發明(設計)人: 代小菲;楊超 申請(專利權)人: 上海中科新生命生物科技有限公司
主分類號: G01N30/88 分類號: G01N30/88
代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 代理人: 肖平安
地址: 201109 上海*** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 基于 lc ms 同時 測定 多種 神經 血清 方法
【權利要求書】:

1.一種基于LC-MS同時測定多種神經遞質的人血清測定方法,其特征在于,包括如下步驟:

步驟S1樣本處理,將待測血清樣本加入含甲酸的乙腈溶液中,待測血清樣本與含甲酸的乙腈溶液體積比例為血清樣本:含甲酸的乙腈溶液=1:4,甲酸含量為1%,再進行冰浴超聲波處理,所述的冰浴超聲波處理中的超聲波功率為180W,處理時間為20-40min,低溫孵育,低溫高速離心,取上清液體進行冷凍干燥,再加入含甲酸的乙腈-水溶液復溶,再次低溫高速離心,取上清液上機備用;

步驟S2色譜分離,取步驟S1獲得的上清液進行色譜分離,A相為含25mM甲酸銨的0.1%甲酸水溶液,B相為含0.1%甲酸的乙腈溶液,液相梯度如下,0-1min,B相維持在95%;1-14min,B相從95%線性變化至65%;14-16min,B相從65%線性變化至40%;16-18min,B相維持在40%;18-18.1min,B相從40%線性變化至95%;18.1-23min,B相維持在95%;

步驟S3質譜分析,步驟S2分離后的樣品進行正離子掃描模式的質譜分析,離子源的條件如下,離子源溫度:450℃,輔助氣壓1:60,輔助氣壓2:60,氣簾氣壓:30,離子噴霧電壓:5000V;

質譜分析的各離子對及其對應的去簇電壓、碰撞電壓和碰撞池出口電壓參數如下:

所述的步驟S3中的質譜分析采用多反應監測模式檢測待測離子對。

2.根據權利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經遞質的人血清測定方法,其特征在于,所述含甲酸的乙腈-水溶液中含有1%的甲酸,其中乙腈與水的體積比例=4:1。

3.根據權利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經遞質的人血清測定方法,其特征在于,所述的低溫孵育是-20℃孵育1h;所述的低溫高速離心是使用14000rcf 4℃離心20min。

4.根據權利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經遞質的人血清測定方法,其特征在于,所述的步驟S2中的色譜分離的色譜柱溫度為35℃,流速為300μL/min。

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