[發(fā)明專利]一種基于LC-MS同時測定多種神經(jīng)遞質(zhì)的人血清測定方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010183512.1 | 申請日: | 2020-03-16 |
| 公開(公告)號: | CN111337609B | 公開(公告)日: | 2023-03-21 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 代小菲;楊超 | 申請(專利權(quán))人: | 上海中科新生命生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/88 | 分類號: | G01N30/88 |
| 代理公司: | 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 肖平安 |
| 地址: | 201109 上海*** | 國省代碼: | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 基于 lc ms 同時 測定 多種 神經(jīng) 血清 方法 | ||
1.一種基于LC-MS同時測定多種神經(jīng)遞質(zhì)的人血清測定方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟S1樣本處理,將待測血清樣本加入含甲酸的乙腈溶液中,待測血清樣本與含甲酸的乙腈溶液體積比例為血清樣本:含甲酸的乙腈溶液=1:4,甲酸含量為1%,再進行冰浴超聲波處理,所述的冰浴超聲波處理中的超聲波功率為180W,處理時間為20-40min,低溫孵育,低溫高速離心,取上清液體進行冷凍干燥,再加入含甲酸的乙腈-水溶液復(fù)溶,再次低溫高速離心,取上清液上機備用;
步驟S2色譜分離,取步驟S1獲得的上清液進行色譜分離,A相為含25mM甲酸銨的0.1%甲酸水溶液,B相為含0.1%甲酸的乙腈溶液,液相梯度如下,0-1min,B相維持在95%;1-14min,B相從95%線性變化至65%;14-16min,B相從65%線性變化至40%;16-18min,B相維持在40%;18-18.1min,B相從40%線性變化至95%;18.1-23min,B相維持在95%;
步驟S3質(zhì)譜分析,步驟S2分離后的樣品進行正離子掃描模式的質(zhì)譜分析,離子源的條件如下,離子源溫度:450℃,輔助氣壓1:60,輔助氣壓2:60,氣簾氣壓:30,離子噴霧電壓:5000V;
質(zhì)譜分析的各離子對及其對應(yīng)的去簇電壓、碰撞電壓和碰撞池出口電壓參數(shù)如下:
所述的步驟S3中的質(zhì)譜分析采用多反應(yīng)監(jiān)測模式檢測待測離子對。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經(jīng)遞質(zhì)的人血清測定方法,其特征在于,所述含甲酸的乙腈-水溶液中含有1%的甲酸,其中乙腈與水的體積比例=4:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經(jīng)遞質(zhì)的人血清測定方法,其特征在于,所述的低溫孵育是-20℃孵育1h;所述的低溫高速離心是使用14000rcf 4℃離心20min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于LC-MS同時測定多種神經(jīng)遞質(zhì)的人血清測定方法,其特征在于,所述的步驟S2中的色譜分離的色譜柱溫度為35℃,流速為300μL/min。
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