[發明專利]含包封有PLP依賴性酶及其輔助因子的紅細胞的藥物組合物

在審

• 申請號: 202010182496.4
• 申請日: 2015-02-12
• 公開（公告）號: CN111358941A
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: 揚·戈德弗蘭;瓦內薩·布爾若;法比安·蓋伊;托馬斯·科特斯
• 申請（專利權）人: 愛瑞泰克藥物公司
• 主分類號: A61K38/51
• 分類號: A61K38/51;A61K9/50;A61K47/46;A61P35/00;A61P9/00;A61P25/00;A61P27/02;A61P19/08;A61P43/00;A61K35/18;A61K31/675
• 代理公司: 上海思微知識產權代理事務所(普通合伙) 31237
• 代理人: 曹廷廷

本發明涉及含包封有PLP依賴性酶及其輔助因子的紅細胞的藥物組合物。根據一實施例的試劑盒或組合物至少包括可注射藥物懸浮液及包括足量的藥學上可接受的PLP前體的組合物，所述可注射藥物懸浮液包括紅細胞和藥學上可接受的載體，所述紅細胞包封多個PLP依賴性酶分子且包括足量的吡哆醇(PN)激酶和磷酸吡哆醇(PNP)氧化酶，以將患者或對象的血流內存在的PLP前體轉化為足量的PLP，以使充足的PLP依懶性酶分子維持處于其全酶形式以在注射后維持酶活性24小時以上。

本申請是申請號為201580007812.1，申請日為2015年02月12日，發明名稱為“含包封有PLP依賴性酶及其輔助因子的紅細胞的藥物組合物”的專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及一種含PLP依賴性酶(例如蛋氨酸酶)及其輔助因子(可選)，磷酸吡哆醛(Pyridoxal Phosphate，PLP或P5P)，和/或PLP的磷酸鹽前體或非磷酸鹽前體的藥物組合物，其作為藥物的用途，其生產方法，以及與其相關的治療方法。

背景技術

磷酸吡哆醛(PLP)為一種維生素B6衍生物，而且是一種用于多種酶的輔助因子。PLP依賴性酶(本文稱“PLP酶”)為大約由145種不同酶組成的酶群，這些酶中的大部分參與氨基酸轉化代謝途徑。這些酶可催化的反應包括脫羧、轉胺或進一步的脫除反應(《Percudani and Perrachi,EMBO reports Vol.4no.9,2003》)。

由于PLP酶群含有大量的酶，以及由于這些酶可催化各種反應，已有研究對其在人類治療中的潛在用途進行了調查。在PLP酶相關的各種治療介入可能性當中，其在癌癥和心血管病癥治療方面的用途已成為許多研究的課題(《El-Sayed and Shindia基因治療靶點(Targets in gene therapy)Prof.Yongping You ed.,2011》)。更具體而言，蛋氨酸酶因其在消耗血漿蛋氨酸及誘發蛋氨酸營養缺陷型腫瘤細胞的凋亡方面的作用而受到關注。已有證據表明，許多人腫瘤細胞在當培養基中的蛋氨酸由其前體高半胱氨酸取代時無法增殖，而正常細胞卻具有在此培養基中增殖的能力。從乳腺癌、肺癌、結腸癌、腎癌、膀胱癌、黑色素瘤和膠質母細胞瘤中衍生的細胞系中，可明顯觀察到這種對蛋氨酸的依賴性(《Durandoet al.,Bull Cancer 2008；95(1):69-76》)。

盡管PLP酶已在治療方面得到關注，但是在為這些酶開發基于全身給藥途徑的治療方法時卻受到下述各顯著限制：

·PLP酶主要從原核生物中獲得，因此當將其給藥于人時會表現出強烈的免疫原性；

·其在血漿中的半衰期很短，為了獲得足夠的活性，需要頻繁或大劑量給藥；

·PLP輔助因子在血漿中的生物利用率較低，從而使得其活性在給藥后迅速下降。

對于蛋氨酸酶，上述限制已得到廣泛報道。Sun等根據提取自惡臭假單胞菌的蛋氨酸酶基因編碼，在大腸桿菌中制成了重組蛋氨酸酶。通過該方式獲得的酶被命名為rMETase，并靜脈注射至免疫缺陷小鼠體內。注射后24小時，在未添加PLP的情況下對上述酶的血漿活性進行體外測定的結果為未測出，從而說明其作用時間較短(《Sunet al.癌癥研究(Cancer Research)63,8377-8383,2003》)。

一年后，同一研究組公布了rMETase在獼猴體內的給藥結果(《Yang et al.臨床癌癥研究(Clinical Cancer Research)Vol.10,2131-2138,2004》)。在該研究中，將劑量為1000、2000和4000單位/千克的rMETase靜脈給藥于6只獼猴。第一次注射28天后進行第二次注射，結果導致兩只獼猴發生過敏性休克，并最終導致其中的一只獼猴死亡。此外，在大多數(6只中的4只)給藥獼猴體內，rMETase的免疫原性導致生成IgG型(主要型)和IgM型抗rMETase抗體。之后，通過體外方式對這些抗體的中和能力進行了表征。