[發明專利]一種同時測定藥物中輔酶NADP和FAD含量的方法

有效

• 申請號: 202010181092.3
• 申請日: 2020-03-16
• 公開（公告）號: CN111380978B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 劉冰;張伶俐;楊惠潔;董衍東;湯禾靜;楊曉容;尚亞寧;王瑩
• 申請（專利權）人: 重慶市食品藥品檢驗檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 深圳泛航知識產權代理事務所(普通合伙) 44867
• 代理人: 鄧愛軍

本發明涉及藥物分析領域，具體公開了一種同時測定藥物中輔酶NADP和FAD含量的方法，該方法使用高效液相色譜法，包括下述步驟：提供高效液相色譜儀、十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱和色譜洗脫用流動相，使用規定的色譜分析條件，制備供試品溶液和對照品溶液等，對相關測試物進行測試。通過本發明專利技術的實施，完整地建立了一種同時測定藥物中輔酶NADP和FAD的分析方法，該方法專屬性好、靈敏度高、定量準確且操作簡單，為NADP和FAD在藥物中的應用和檢測奠定了良好的基礎。

技術領域

本發明涉及藥物分析領域，尤其涉及一種同時測定藥物中輔酶NADP和FAD含量的方法。

背景技術

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADP)和黃素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide，FAD)均為體內重要的輔酶，與糖類、脂肪、蛋白質等體內代謝廣泛相關，在所有生物的新陳代謝中發揮著重要作用。

NADP是細胞內抗氧化防御系統的重要組成部分，可以阻止或逆轉氧化劑對細胞的損害，同時還參與藥物及有毒有害物質在體內的代謝，利于其排出體外。FAD是維生素B2在人體內最為有效的活性形式，目前已作為藥品治療維生素B2缺乏癥等疾病，同時，還用于食品、化妝品等的添加劑。綜上所述，這兩種輔酶在科研、藥物、食品等領域具有廣泛應用。

目前，NADP的檢測方法包括電化學法、紫外分光光度法、熒光光度法等；FAD檢測方法包括紫外-可見分光光度法、高效液相色譜法等，上述方法存在多種瓶頸問題，如操作復雜、專屬性不強、靈敏度低等。隨著輔酶NADP和FAD在藥物等領域的廣泛應用，建立一套快速、靈敏、簡便、準確的分析方法迫在眉睫，目前還沒有一種同時測定輔酶NADP和FAD含量的方法。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種能同時測定藥物中輔酶NADP和FAD含量且專屬性良好、靈敏度高、定量準確的方法。

本發明提供了一種同時測定藥物中輔酶NADP和FAD含量的方法，包括以下步驟：

(1)分別制備供試品溶液和對照品溶液；

(2)精密量取供試品溶液和對照品溶液后分別注入液相色譜儀，按照下列高效液相色譜條件進行測定：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

流動相A：甲醇；

流動相B：0.2％磷酸二氫鉀水溶液；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

檢測波長：260nm；

進樣體積：20μl；

采用如下線性梯度洗脫程序：

(3)按外標法，以峰面積分別計算輔酶NADP和FAD的含量。

優選地，在步驟(1)中，取供試品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml含20mg的溶液，作為所述供試品溶液。

優選地，在步驟(1)中，精密稱取NADP和FAD對照品適量，加水溶解并定量稀釋制成每1ml約各含2μg的溶液，作為所述對照品溶液。

優選地，在步驟(1)中，制備過程避光操作。

優選地，在步驟(2)中，所述色譜柱的長度為250mm，直徑為4.6mm，填料粒徑為5μm。