[發明專利]一種LvCTL3基因及編碼的蛋白質、蛋白質的獲取方法、表達載體、重組菌和應用

在審

• 申請號: 202010175648.8
• 申請日: 2020-03-13
• 公開（公告）號: CN111394358A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 黎銘;馬春霞;熊建華;梁湘;朱鵬;陳福艷;雷愛瑩
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區水產科學研究院
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/435;C12N15/81;C12N1/19;A23K50/80;A23K10/18;A61K48/00;A61P31/04;C12R1/84
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 朱玲艷

本發明提供了一種LvCTL3基因及編碼的蛋白、蛋白質的獲取方法、表達載體、重組菌和應用，屬于基因工程技術領域，所述LvCTL3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明提供的LvCTL3基因連接到到載體中，將得到的表達載體電轉化到畢赤酵母中，表達得到LvCTL3基因編碼的蛋白質，代替目前水產飼料中使用的抗生素，以達到既可預防和治療動物疾病，又可減少濫用素帶來的不良后果的目的。

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，尤其涉及一種LvCTL3基因及編碼的蛋白、蛋白質的獲取方法、表達載體、重組菌和應用。

背景技術

養殖業是現代農業重要組成部分，是人類蛋白食品重要來源。當前養殖生產過程中面臨最大問題就是病害問題：細菌、病毒病感染經常引起起畜禽水產動物發生疾病，甚至大量死亡，從而帶來巨額經濟損失。為了預防和控制病害發生，養殖戶不得不大量使用化學藥物進行場地消毒，或者在飼料中添加抗生素類藥物。然而使用化學藥物或者抗生素類藥物會帶來嚴重的生態破壞以及食品安全問題，因此，開發一種可部分甚至全部取代化學或抗生素類藥物使用的安全有效的抗菌或抗病毒藥具有重要的經濟價值和社會意義。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種LvCTL3基因及編碼的蛋白、蛋白質的獲取方法、表達載體、重組菌和應用，本發明提供的LvCTL3基因連接到到載體中，將得到的表達載體電轉化到畢赤酵母中，表達得到LvCTL3 基因編碼的蛋白質，代替目前水產飼料中使用的抗生素，以達到既可預防和治療動物疾病，又可減少濫用素帶來的不良后果的目的。

為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種LvCTL3基因，所述LvCTL3基因的核苷酸序列如 SEQ ID No.1所示。

本發明還提供了上述技術方案所述的LvCTL3基因編碼的蛋白質，所述蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

本發明還提供了一種表達載體，將上述技術方案所述的LvCTL3基因連接到酵母表達載體pPIC9K的EcoRI位點和NotI位點之間，得到表達載體。

本發明還提供了一種重組菌，將上述技術方案所述的表達載體轉入 Top10克隆菌株中，提取質粒，將所述質粒電轉化到畢赤酵母中，得到重組菌。

優選的，所述畢赤酵母包括畢赤酵母GS115。

本發明還提供了一種上述技術方案所述的LvCTL3基因編碼的蛋白質的獲取方法，將上述技術方案所述的重組菌進行液體培養，將得到的培養液離心，得到上清液，純化所述上清液中LvCTL3基因編碼的蛋白質，得到蛋白質。

本發明還提供了上述技術方案所述的重組菌在制備水生動物抗菌藥物、疫苗或飼料添加劑中的應用。

優選的，所述水生動物包括魚或蝦。

本發明提供了一種LvCTL3基因及編碼的蛋白、蛋白質的獲取方法、表達載體、重組菌和應用，所述LvCTL3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明提供的LvCTL3基因連接到到載體中，將得到的表達載體電轉化到畢赤酵母中，表達得到LvCTL3基因編碼的蛋白質，代替目前水產飼料中使用的抗生素，以達到既可預防和治療動物疾病，又可減少濫用素帶來的不良后果的目的。

附圖說明

圖1為pPIC9K載體的質粒圖譜；

圖2為pPIC9K-WAP+Crustinlike+pvHM117質粒構建框架；

圖3為pPIC9K-WAP+Crustinlike+pvHM117質粒酶切鑒定；

圖4為pPIC9K-WAP+Crustinlike+pvHM117電轉酵母細胞GS115結果；