[發(fā)明專利]一種脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物及其合成與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010173607.5
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111748002B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金紹明;葛紹陽;劉治麟;王鵬杰;杜仲堯
• 申請（專利權(quán)）人: 北京和益源生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07H15/04
• 分類號: C07H15/04;C07H1/00;A61P35/00;A61K47/54;A61K47/69;A61K33/243
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本發(fā)明公開了一種脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物及其合成與應(yīng)用，所述衍生物是將葉酸和脫氧葡萄糖通過化學(xué)鍵的方式結(jié)合在一起，形成的一種新型化合物——FA?2?DG。所述衍生物中，葉酸和脫氧葡萄糖之間以氨基乙醇做為連接臂，葉酸的羧基和氨基乙醇的氨基相連，形成酰胺鍵；氨基乙醇的羥基和脫氧葡萄糖的羥基相連，生成糖苷鍵。這樣的連接方式既不破壞葉酸和脫氧葡萄糖本身的結(jié)構(gòu)和功能，不影響葉酸受體對葉酸的識別，同時(shí)引入的兩個(gè)碳原子的連接臂也能增大葉酸和脫氧葡萄糖兩個(gè)分子之間的距離，更適宜糖苷酶的水解，釋放出具有抗腫瘤活性的脫氧葡萄糖。所述衍生物FA?2?DG基于其結(jié)構(gòu)的特征，可以作為藥質(zhì)體用來載藥。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及到一種脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物及其合成與應(yīng)用。

背景技術(shù)

惡性腫瘤是當(dāng)今危害人類健康的復(fù)雜疾病，每年造成的人類死亡人數(shù)僅次于心腦血管疾病。葉酸受體高表達(dá)的腫瘤在女性群體中有較高的發(fā)病率，開發(fā)基于葉酸識別的靶向抗腫瘤藥物一直是腫瘤藥物研發(fā)的熱點(diǎn)內(nèi)容之一。目前，基于葉酸開發(fā)的多種靶向抗腫瘤藥物已多有報(bào)道，大多是用葉酸修飾大分子PEG(聚乙二醇)，然后制備具有靶向功能的脂質(zhì)體運(yùn)載抗腫瘤藥物，這種治療策略制備的脂質(zhì)體的粒徑不均一，運(yùn)載抗腫瘤藥物的效率較低，療效較差且修飾之后的大分子在體內(nèi)也容易引起免疫反應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物及其合成與應(yīng)用，在研究兩親性小分子藥物的基礎(chǔ)上，應(yīng)用具有抗腫瘤活性的小分子脫氧葡萄糖修飾葉酸，制備出具有靶向抗腫瘤功能，且能夠自組裝形成納米結(jié)構(gòu)，運(yùn)載抗腫瘤藥物的新型葉酸衍生物。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物，所述葉酸衍生物(FA-2-DG)由脫氧葡萄糖和葉酸經(jīng)由氨基乙醇連接形成，其中葉酸的羧基和氨基乙醇的氨基相連，形成酰胺鍵，氨基乙醇的羥基和脫氧葡萄糖的羥基相連，形成糖苷鍵。

所述脫氧葡萄糖修飾的葉酸衍生物的合成方法，包括以下步驟：

1)制備(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氫-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃

將2-脫氧葡萄糖溶解于無水吡啶中形成溶液，冰浴攪拌條件下將乙酸酐滴加入溶液中，滴加完畢后撤掉冰浴，室溫下攪拌24小時(shí)，然后旋蒸除掉溶劑，加入乙酸乙酯溶解剩余固體，然后用檸檬酸水溶液，碳酸氫鈉水溶液，飽和氯化鈉水溶液各萃洗三次，之后乙酸乙酯用無水硫酸鈉干燥過夜，過濾之后減壓除去乙酸乙酯，用柱層析法純化，得到的產(chǎn)物乙酰基保護(hù)羥基的脫氧葡萄糖，即(4R，5S，6R)-6-(乙酰氧甲基)-四氫-2，4，5-三乙酰氧基-吡喃，簡稱化合物2；

2)制備(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氫-3，4-二乙酰氧基-吡喃

將化合物2溶解于二氯甲烷中，加入2-溴乙醇，冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚，滴加完畢后撤除冰浴，室溫下反應(yīng)，然后加入冷卻過的飽和碳酸氫鈉水溶液終止反應(yīng)，分離出二氯甲烷層，并用二氯甲烷萃取水相兩次，合并二氯甲烷，用飽和氯化鈉水溶液萃洗三次之后用無水硫酸鈉干燥過夜；過濾之后減壓除去二氯甲烷，剩余油狀物用硅膠柱層析純化，洗脫液為石油醚∶乙酸乙酯，從10∶1洗脫至5∶1，得到黃色油狀物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氫-3，4-二乙酰氧基-吡，簡稱化合物3；

3)制備(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-疊氮乙氧基)四氫-3，4-二乙酰氧基-吡喃

將化合物3和疊氮化鈉溶解于二甲基甲酰胺中，加熱條件下攪拌，反應(yīng)后加入冰水終止反應(yīng)，然后用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機(jī)相，用飽和氯化鈉水溶液萃洗三次之后用無水硫酸鈉干燥過夜；過濾之后減壓除去乙酸乙酯，得到黃色油狀物，即(2R，3S，4R)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-疊氮乙氧基)四氫-3，4-二乙酰氧基-吡喃，簡稱化合物4；