[發明專利]一種檢測甘姜苓術湯指紋圖譜的方法

有效

• 申請號: 202010172497.0
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111443138B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 肖偉;胡軍華;王雪寧;殷洪梅;付娟;吳云;章晨峰;王振中
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙) 11446
• 代理人: 姚志遠;項榮

本發明公開了一種檢測甘姜苓術湯指紋圖譜的方法，其特征在于，取甘姜苓術湯供試品溶液進行HPLC檢測，HPLC檢測的色譜條件包括：采用C18色譜柱，以乙腈為流動相A，含有0.1％濃度的磷酸水溶液為流動相B，所述HPLC檢測的色譜條件中的洗脫為梯度洗脫，該梯度洗脫程序為：0～12min，流動相為93％～73％A；12～34min，流動相為73％～35％A；34～40min，流動相為35％～30％A。利用本發明方法對所含化學成分的種類與數量進行全面的檢測，據此建立甘姜苓術湯物質基準指紋圖譜，能全面地反映其中所含化學成分的種類與數量，進而對制劑質量進行整體描述和評價。

技術領域

本發明涉及分析化學技術領域，特別涉及一種檢測甘姜苓術湯指紋圖譜的方法。

背景技術

甘姜苓術湯來源于漢·張仲景的《金匱要略》，處方由干姜、白術、茯苓、甘草組成。干姜為君藥溫中散寒，茯苓、白術同為臣藥健脾化濕，甘草為使藥調和諸藥，全方共奏溫陽散寒祛濕之功效。

中藥及其制劑均為多組分復雜體系，因此評價其質量應采用與之相適應的方法。中藥指紋圖譜是一種綜合可量化的鑒定手段，主要用于評價中藥以及其制劑質量的真實性、優良性與穩定性。能提供豐富鑒別信息的檢測方法，建立中藥指紋圖譜將能較為全面地反映中藥及其制劑中所含化學成分的種類與數量，進而對制劑質量進行整體描述和評價。為了更好地對制劑質量進行控制，保證其臨床療效，建立其成分檢測方法全面評價該制劑質量。

甘姜苓術湯為復方制劑，化學成分復雜，有效成分包括黃酮類、萜類化合物等。有必要對其中的化學成分進行檢測，以更好地實現對復方制劑的質量控制和評價。

發明內容

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

一種檢測甘姜苓術湯指紋圖譜的方法，其特征在于，取甘姜苓術湯供試品溶液進行HPLC檢測，HPLC檢測的色譜條件包括：

采用C18色譜柱，以乙腈為流動相A，含有0.1％濃度的磷酸水溶液為流動相B，所述HPLC檢測的色譜條件中的洗脫為梯度洗脫，該梯度洗脫程序為：0～12min，流動相為93％～73％A；12～34min，流動相為73％～35％A；34～40min，流動相為35％～30％A。

可選地，所述甘姜苓術湯供試品溶液的制備為，取甘姜苓術湯物質基準粉末0.1g，置25mL容量瓶中，加水溶解定容，即得。

可選地，甘姜苓術湯物質基準制備方法包括：取干姜12g、茯苓12g、白術6g、甘草6g以上四味藥材，置于煎液壺中，加純化水煎煮，過濾，濾液冷卻至室溫，將濾液旋蒸濃縮，將濃縮藥液采用程序冷凍干燥，即得甘姜苓術湯物質基準粉末。

進一步地，所述色譜條件包括：流速為0.8～1.2mL/min，柱溫為25～35℃，檢測波長228～232nm。

更進一步地，所述色譜條件包括：所述流速為1.0mL/min，所述柱溫為30℃，檢測波長230nm。

具體地，所述C18色譜柱選自Agilent Zorbax SB-C18色譜柱、Phenomenex GeminiC18色譜柱、Thermo syncronis C18色譜柱、Agilent 5TC-C18色譜柱、Kromasil 100-5-C18色譜柱、Welch Xtimate C18色譜柱、Waters symmetry C18色譜柱或Phenomenex Luna C18色譜柱。

進一步地，上述檢測方法還包括對照品的檢測，所述對照品包括6-姜辣素、甘草苷、甘草酸銨、茯苓酸、白術內酯Ⅰ、白術內酯Ⅱ、白術內酯Ⅲ標準品中的一種或多種。

具體地，所述對照品被制備成溶液進行檢測的方法：取6-姜辣素、甘草苷、甘草酸銨、茯苓酸、白術內酯Ⅰ、白術內酯Ⅱ、白術內酯Ⅲ標準品，加甲醇制成每1mL含20～100μg的單標或混標溶液。