[發明專利]超高效液相色譜串聯質譜技術檢測血清中9種水溶性維生素的試劑盒

在審

• 申請號: 202010172197.2
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111398449A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 成曉亮;李美娟
• 申請（專利權）人: 南京品生醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種超高效液相色譜串聯質譜技術檢測血清中9種水溶性維生素的試劑盒，

所述9種水溶性維生素分別為：維生素B1、維生素B2、維生素B3、維生素B5、維生素B6、維生素B7、維生素B12、5-甲基四氫葉酸和維生素C；

所述的試劑盒包含如下試劑：

(1)洗脫液：

洗脫液A：0.01～0.5％甲酸-1～10mM甲酸銨水溶液；洗脫液B：甲醇；

(2)校準品溶液：

將包含有1000ng/mL維生素B1、1000ng/mL維生素B2、4000ng/mL維生素B3、8000ng/mL維生素B5、2000ng/mL維生素B6、100ng/mL維生素B7、250ng/mL維生素B12、4000ng/mL5-甲基四氫葉酸和1000000ng/mL維生素C的混合標準S0溶液以空白血清基質溶液配制成七個不同濃度點的校準品溶液，所述校準品溶液的七個濃度點為：

維生素B1和維生素B2的濃度相同，依次為0.4ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL和50ng/mL；

維生素B3和5-甲基四氫葉酸的濃度相同，依次為1.6ng/mL、4ng/mL、8ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL和200ng/mL；

維生素B5的濃度依次為3.2ng/mL、8ng/mL、16ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、200ng/mL和400ng/mL；

維生素B6的濃度依次為0.8ng/mL、2ng/mL、4ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL和100ng/mL；

維生素B7的濃度依次為0.04ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、2.5ng/mL和5ng/mL；

維生素B12的濃度依次為0.1ng/mL、0.25ng/mL、0.5ng/mL、1.25ng/mL、2.5ng/mL、6.25ng/mL和12.5ng/mL；

維生素C的濃度依次為400ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、5000ng/mL、10000ng/mL、25000ng/mL和50000ng/mL；

(3)混合內標工作液：

包含有10ng/mL維生素B1-13C4、20ng/mL維生素B2-13C4,15N2、20ng/mL維生素B3-13C3,15N、40ng/mL維生素B5-13C3,15N、10ng/mL維生素B6-d3、2ng/mL維生素B7-d4、2ng/mL維生素B12-15N6、50ng/mL 5-甲基四氫葉酸-13C,d3和5000ng/mL維生素C-13C6；

(4)蛋白質沉淀劑：甲醇；

(5)質控品：

含有9種水溶性維生素的空白血清基質溶液，分為低、中、高三個濃度，分別為QC(L)、QC(M)和QC(H)，其中：

QC(L)為所述混合標準S0溶液以空白血清基質溶液稀釋至1000倍；

QC(M)為所述混合標準S0溶液以空白血清基質溶液稀釋至200倍；

QC(H)為所述混合標準S0溶液以空白血清基質溶液稀釋至20倍。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，

所述洗脫液A為0.1～0.5％甲酸-1～5mM甲酸銨水溶液；優選為0.1％甲酸-2mM甲酸銨水溶液。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，

所述空白血清基質為0.05～0.5％甲酸-5～20％甲醇水溶液；優選為0.1～0.5％甲酸-5～15％甲醇水溶液；更優選為0.1％甲酸-10％甲醇水溶液。