[發(fā)明專利]一種肽類化合物和含有該化合物的冷凍保存液

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010171868.3
• 申請(qǐng)日: 2020-03-12
• 公開（公告）號(hào): CN111793109B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王健君;金晟琳;嚴(yán)杰;喬杰;閆麗盈;李蓉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所;北京大學(xué)第三醫(yī)院（北京大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院）
• 主分類號(hào): C07K5/062
• 分類號(hào): C07K5/062;C07K5/068;C07K5/078;C07K5/083;A01N1/02
• 代理公司: 北京知元同創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11535
• 代理人: 黃越;焦健

本發(fā)明公開了一種肽類化合物和含有該化合物的冷凍保存液。所述肽類化合物由親冰氨基酸和親水基團(tuán)組成，在水溶液中具有良好的抑制冰晶生長(zhǎng)和修飾冰晶形貌的能力，且沒(méi)有熱滯后，生物相容性好，是理想的控冰材料。含有上述肽類化合物的冷凍保存液含有上述肽類化合物和多元醇、水溶性糖等組分，用于胚胎或卵母細(xì)胞保存可保持良好的存活率，成分簡(jiǎn)單，性能穩(wěn)定。

本申請(qǐng)要求2019年4月9日向中國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)?zhí)枮?01910281986.7，發(fā)明名稱為“一種肽類化合物和含有該化合物的冷凍保存液”的在先申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)。該在先申請(qǐng)的全文通過(guò)引用的方式結(jié)合于本申請(qǐng)中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)用材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種肽類化合物和含有該化合物的冷凍保存液。

背景技術(shù)

冷凍保存是指將生物材料保存于超低溫狀態(tài)下，使細(xì)胞新陳代謝和分裂速度減慢或者停止，一旦恢復(fù)正常生理溫度又能繼續(xù)發(fā)育。該技術(shù)自問(wèn)世以來(lái)，成為自然科學(xué)領(lǐng)域不可缺少的研究方法之一，已被廣泛采用。近年來(lái)，隨著生活壓力的增加，人類生育力呈逐年下降的趨勢(shì)，生育力保存越來(lái)越受到人們的重視，人類生殖細(xì)胞(精子、卵母細(xì)胞)、性腺組織等的冷凍保存就成為保存生育力的重要手段。另外，隨著世界人口老齡化加劇，對(duì)捐贈(zèng)的可用于再生醫(yī)學(xué)和器官移植的人源性細(xì)胞、組織或器官的冷凍保存的需求也極速增加。因此，如何高效的冷凍保存珍貴的細(xì)胞、組織以及器官資源以備不時(shí)之需成為亟待解決的科學(xué)技術(shù)問(wèn)題。

目前最常用的冷凍保存方法為玻璃化冷凍。玻璃化冷凍技術(shù)雖然在快速冷凍過(guò)程中可使細(xì)胞內(nèi)外的液體均成玻璃化狀態(tài)而避免了冷凍過(guò)程中的損傷。但是，在復(fù)溫過(guò)程中，現(xiàn)有的冷凍保存試劑不能有效的控制冰晶的生長(zhǎng)，從而損害細(xì)胞。目前玻璃化冷凍方法所使用的高濃度(≥15％)有毒的有機(jī)溶劑，如：DMSO，導(dǎo)致冷凍保存試劑對(duì)細(xì)胞的毒副作用，嚴(yán)重影響冷凍保存對(duì)象復(fù)蘇后的存活率甚至(子代)安全性以及功能表達(dá)。綜上，目前采用的冷凍保存試劑不具備復(fù)溫過(guò)程中有效控制冰晶生長(zhǎng)的能力，同時(shí)存在試劑安全性差的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

為改善現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，本發(fā)明提供一種肽類化合物及其合成方法和含有該化合物的冷凍保存液。

本發(fā)明通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):

一種肽類化合物，由親冰性氨基酸，如：蘇氨酸(L-Thr)、谷氨酰胺(L-Gln)、天冬氨酸(L-Asn)等與其他親水性氨基酸或葡萄糖內(nèi)酯(GDL)或糖類反應(yīng)得到，所述其他親水性氨基酸可選自精氨酸、脯氨酸、丙氨酸等。

根據(jù)本發(fā)明，所述肽類化合物為兩個(gè)以上的氨基酸單元形成的多肽化合物，如：2-8個(gè)氨基酸單元，具體地可以為2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)氨基酸單元；所述多肽化合物由兩種以上不同的氨基酸組成。

作為示例性技術(shù)方案，所述肽類化合物中親冰氨基酸與其他親水氨基酸的摩爾比為(0.1-3)：1，優(yōu)選(0.5-2)：1。

根據(jù)本發(fā)明，所述肽類化合物中親冰氨基酸與其他親水氨基酸的排列方式?jīng)]有特別的限定，可采用本領(lǐng)域已知的氨基酸連接基團(tuán)或化學(xué)鍵連接，例如親冰氨基酸和親水氨基酸可以單個(gè)間次排列，也可以多個(gè)親冰氨基酸或者多個(gè)親水氨基酸相連，形成親冰氨基酸片段或親水氨基酸片段，再分別與親水氨基酸(或片段)、親冰氨基酸(或片段)連接。

根據(jù)本發(fā)明，所述肽類化合物為L(zhǎng)-Thr-L-Arg(TR),L-Thr-L-Pro(TP),L-Arg-L-Thr(RT),L-Pro-L-Thr(PT)，L-Thr-L-Arg-L-Thr(TRT),L-Thr-L-Pro-L-Thr(TPT),L-Ala-L-Ala-L-Thr(AAT)，L-Thr-L-Cys-L-Thr(TCT)中的至少一種。

根據(jù)本發(fā)明，所述肽類化合物為葡萄糖內(nèi)酯或其他糖類與親冰氨基酸通過(guò)化學(xué)鍵合而組成的分子，例如：GDL-L-Thr，GDL-L-Gln,GDL-L-Asn,GDL-L-Phe，GDL-L-Tyr，-GDL-L-Val，GDL-L-Ser。