[發明專利]一種含肽類化合物的冷凍保存液在器官和組織冷凍保存中的應用

有效

• 申請號: 202010171867.9
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111793108B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 嚴杰;喬杰;閆麗盈;李蓉;王健君;金晟琳
• 申請（專利權）人: 北京大學第三醫院（北京大學第三臨床醫學院）;中國科學院化學研究所
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062;C07K5/068;C07K5/078;C07K5/083;A01N1/02
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 黃越;焦健

本發明公開了一種含肽類化合物的冷凍保存液在器官和/或組織冷凍保存中的應用。所述肽類化合物由親冰氨基酸和親水基團組成，在水溶液中具有良好的抑制冰晶生長和修飾冰晶形貌的能力，且沒有熱滯后，生物相容性好，是理想的控冰材料。含有上述肽類化合物的冷凍保存液含有上述肽類化合物和多元醇、水溶性糖等組分，用于卵巢組織或器官的冷凍保存可以維持完整的卵泡結構，冷凍保存液成分簡單，性能穩定。

本申請要求2019年4月9日向中國國家知識產權局提交的專利申請號為201910281986.7，發明名稱為“一種肽類化合物和含有該化合物的冷凍保存液”的在先申請的優先權。該在先申請的全文通過引用的方式結合于本申請中。

技術領域

本發明屬于生物醫用材料技術領域，具體涉及一種含肽類化合物的冷凍保存液在器官和組織冷凍保存中的應用。

背景技術

冷凍保存是指將生物材料保存于超低溫狀態下，使細胞新陳代謝和分裂速度減慢或者停止，一旦恢復正常生理溫度又能繼續發育。該技術自問世以來，成為自然科學領域不可缺少的研究方法之一，已被廣泛采用。近年來，隨著生活壓力的增加，人類生育力呈逐年下降的趨勢，生育力保存越來越受到人們的重視，人類生殖細胞(精子、卵母細胞)、性腺組織等的冷凍保存就成為保存生育力的重要手段。另外，隨著世界人口老齡化加劇，對捐贈的可用于再生醫學和器官移植的人源性細胞、組織或器官的冷凍保存的需求也極速增加。因此，如何高效的冷凍保存珍貴的細胞、組織以及器官資源以備不時之需成為亟待解決的科學技術問題。

目前最常用的冷凍保存方法為玻璃化冷凍。玻璃化冷凍技術雖然在快速冷凍過程中可使細胞內外的液體均成玻璃化狀態而避免了冷凍過程中的損傷。但是，在復溫過程中，現有的冷凍保存試劑不能有效的控制冰晶的生長，從而損害細胞。目前玻璃化冷凍方法所使用的高濃度(≥15％)有毒的有機溶劑，如：DMSO，導致冷凍保存試劑對細胞的毒副作用，嚴重影響冷凍保存對象復蘇后的存活率甚至(子代)安全性以及功能表達。綜上，目前采用的冷凍保存試劑不具備復溫過程中有效控制冰晶生長的能力，同時存在試劑安全性差的問題。

發明內容

為改善現有技術的上述缺陷，本發明提供一種肽類化合物及其合成方法和含有該化合物的冷凍保存液及其應用。

本發明通過如下技術方案實現:

一種肽類化合物，由親冰性氨基酸，如：蘇氨酸(L-Thr)、谷氨酰胺(L-Gln)、天冬氨酸(L-Asn)等與其他親水性氨基酸或葡萄糖內酯(GDL)或糖類反應得到，所述其他親水性氨基酸可選自精氨酸、脯氨酸、丙氨酸等。

根據本發明，所述肽類化合物為兩個以上的氨基酸單元形成的多肽化合物，如：2-8個氨基酸單元，具體地可以為2個、3個、4個、5個、6個氨基酸單元；所述多肽化合物由兩種以上不同的氨基酸組成。

作為示例性技術方案，所述肽類化合物中親冰氨基酸與其他親水氨基酸的摩爾比為(0.1-3)：1，優選(0.5-2)：1。

根據本發明，所述肽類化合物中親冰氨基酸與其他親水氨基酸的排列方式沒有特別的限定，可采用本領域已知的氨基酸連接基團或化學鍵連接，例如親冰氨基酸和親水氨基酸可以單個間次排列，也可以多個親冰氨基酸或者多個親水氨基酸相連，形成親冰氨基酸片段或親水氨基酸片段，再分別與親水氨基酸(或片段)、親冰氨基酸(或片段)連接。

根據本發明，所述肽類化合物為L-Thr-L-Arg(TR),L-Thr-L-Pro(TP),L-Arg-L-Thr(RT),L-Pro-L-Thr(PT)，L-Thr-L-Arg-L-Thr(TRT),L-Thr-L-Pro-L-Thr(TPT),L-Ala-L-Ala-L-Thr(AAT)，L-Thr-L-Cys-L-Thr(TCT)中的至少一種。

根據本發明，所述肽類化合物為葡萄糖內酯或其他糖類與親冰氨基酸通過化學鍵合而組成的分子，例如：