[發明專利]制備右旋酰胺酮洛芬的方法有效
| 申請號: | 202010170981.X | 申請日: | 2020-03-12 |
| 公開(公告)號: | CN111334495B | 公開(公告)日: | 2022-04-29 |
| 發明(設計)人: | 王小龍;林潔;謝文平;李文佳;張慧;楊燕花;韋德活;楊志雄;鮑素敏 | 申請(專利權)人: | 宜昌東陽光生化制藥有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/80 | 分類號: | C12N9/80;C12N9/88;C12P7/40;C12P13/02 |
| 代理公司: | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖陽 |
| 地址: | 443300 湖北*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 制備 右旋 酰胺酮洛芬 方法 | ||
1.酶組合在用于右旋酮洛芬的合成的中的用途,所述酶組合包括:腈水合酶和酰胺酶,所述腈水合酶來源于紅假單胞菌屬(
2.一種制備右旋酰胺酮洛芬的方法,其特征在于,使氰基酮洛芬在腈水合酶的催化下進行酰胺化反應,以便獲得右旋酰胺酮洛芬,所述腈水合酶來源于紅假單胞菌屬(
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述腈水合酶是以腈水合酶發酵菌體的形式提供的。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述腈水合酶發酵菌體是通過如下方式獲得的:
將轉化有質粒的大腸桿菌菌體進行活化處理,所述質粒中攜帶表達腈水合酶的核酸序列;
將活化處理后菌液進行基礎發酵培養,以便獲得OD600為30~35的基礎發酵培養菌液;
將所述基礎發酵培養菌液進行誘導培養,所述誘導培養是在IPTG和CoCl2存在的條件下進行的,所述誘導培養的時間為14~16h。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述氰基酮洛芬與腈水合酶發酵菌體的質量比為1:(1~3)。
6.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,進一步包括將所述腈水合酶發酵菌體進行干燥處理,以便獲得菌體干粉。
7.根據權利要求6所述的方法,所述氰基酮洛芬與腈水合酶發酵菌體噴干粉的質量比為(4~6):1。
8.一種制備右旋酮洛芬的方法,其特征在于,依據權利要求2~7任一項所述的方法制備右旋酰胺酮洛芬;
使所述右旋酰胺酮洛芬在酰胺酶的催化下進行脫氨基反應,以便獲得右旋酮洛芬。
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