[發明專利]鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 202010170312.2
• 申請日: 2020-03-12
• 公開（公告）號: CN111381046A
• 公開（公告）日: 2020-07-07
• 發明（設計）人: 高智玲;翟濤;李冬梅;韓美玉;張旭東;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/533
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 于曉慶

1.鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，包括：

鏈霉親和素磁顆粒、化學發光標記物標記的鈣衛蛋白抗體、偶聯標記物標記的鈣衛蛋白抗體、化學發光底物液和鈣衛蛋白校準品。

2.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素磁顆粒中，磁珠濃度為0.02～1％，磁珠粒徑為1.0～3.0μm。

3.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物標記的鈣衛蛋白抗體中，鈣衛蛋白抗體與化學發光標記物的摩爾比為1:3～20。

4.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述偶聯標記物標記的鈣衛蛋白抗體中，鈣衛蛋白抗體與偶聯標記物的摩爾比為1:5～20。

5.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物選自吖啶酯、魯米諾、異魯米諾或三聯吡啶釕中的一種或多種。

6.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述偶聯標記物為生物素。

7.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光底物液包括A液和B液，所述A液為硝酸溶液和過氧化氫溶液的混合液，所述B液為氫氧化鈉溶液。

8.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光底物液包括A液和B液，所述A液為硝酸溶液，所述B液為氫氧化鈉溶液。

9.根據權利要求1所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述鈣衛蛋白校準品的濃度為0ug/g、10ug/g、50ug/g、250ug/g、1250ug/g、6250ug/g和31250ug/g。

10.如權利要求1至9中任意一項所述的鈣衛蛋白化學發光免疫檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、制備鏈霉親和素磁顆粒

取鏈霉親和素磁顆粒溶液，加入TBST溶液，充分混勻，置于磁分離器上，直至上清無混濁，棄上清，留取磁顆粒；重復清洗3次，用50～100mMMES、0.05～0.15％吐溫-20、0.05～0.1％Proclin300，pH6.5～7.5的緩沖液重懸；

步驟二、制備化學發光標記物標記的鈣衛蛋白抗體

將鈣衛蛋白抗體緩沖液置換為PBS，加入化學發光標記物，充分混勻，室溫放置2～4小時后純化標記鈣衛蛋白抗體；將收集到的化學發光標記物標記的鈣衛蛋白抗體置于2～8℃保存；使用時用50～100mMMES或PBS、0.05％吐溫、0.05％Proclin300，pH6～8的緩沖液稀釋至終濃度為0.2～1.0ug/ml；

步驟三、制備偶聯標記物標記的鈣衛蛋白抗體

將鈣衛蛋白抗體溶液置換為PBS，加入偶聯標記物，充分混勻，室溫放置2～4小時后純化標記鈣衛蛋白抗體；將收集到的偶聯標記物標記的鈣衛蛋白抗體用pH6～8的MES或PBS緩沖液稀釋至終濃度為0.5～3.0ug/ml。