[發明專利]靶向腫瘤的酸性敏感納米肽段及其應用

在審

• 申請號: 202010165168.3
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111285936A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 秦志海;陳波;陶寧;李建茹;李香群
• 申請（專利權）人: 北京雙贏科創生物科技有限公司;中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K47/68;A61K47/62;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 賈慧娜;王芊雨

本發明公開了一種靶向腫瘤的酸性敏感納米肽段及其應用。所述靶向腫瘤的酸性敏感納米肽段包括順序串聯的低pH納米插入肽、偶聯劑、以及Fc片段；其中，所述低pH納米插入肽包括序列為SEQ ID NO.1的氨基酸序列或其變體。該靶向腫瘤的酸性敏感納米肽段利用腫瘤微環境pH7微酸環境的特點，給微環境中的腫瘤細胞以及其他基質細胞插入特異性的標記，可以吸引并結合到NK細胞的CD16分子上，由該標記特異性招募激活NK細胞的ADCC功能，達到對腫瘤細胞的殺傷功能。

技術領域

本發明是關于免疫細胞領域，特別是關于一種靶向腫瘤的酸性敏感納米肽段及其應用。

背景技術

自然殺傷細胞(natural killer,NK細胞)是淋巴細胞的一個亞群。其在人體的免疫反應，無論是固有免疫還是特異性免疫中都發揮重要的作用。NK細胞可以在不經過初次免疫刺激和基因編輯的情況下，非MHC依賴性的發揮其免疫殺傷作用。NK細胞殺傷細胞的方式包括三種：①NK細胞釋放的殺傷介質穿孔素和顆粒酶B使靶細胞凋亡，該過程需要NK細胞識別受體和靶細胞的直接接觸方可實現；②NK細胞可以通過膜TNF家族分子(FasL、TRIAL、mTNF等)與靶細胞膜配體結合誘導靶細胞凋亡，該過程不需要NK細胞受體與靶細胞的直接接觸；③NK細胞還可以通過抗腫瘤抗體IgG1和IgG3作為橋梁，其Fab段特異性識別腫瘤，Fc段與NK細胞FcRγⅢa結合，產生依賴抗體的細胞介導的細胞毒作用(ADCC)，該功能主要由CD16⁺NK細胞完成。

腫瘤微環境是由腫瘤細胞、多種基質細胞以及一系列的細胞因子和趨化因子組成。其中基質細胞包括成纖維細胞、腫瘤浸潤的免疫細胞、內皮細胞、骨髓來源未成熟細胞等；細胞因子如TNF、VEGF、IL-1等；趨化因子如CXCL12、CCL27、CCL21等。細胞因子和趨化因子可以由腫瘤細胞分泌，亦可由基質細胞和上述浸潤的免疫細胞產生。這些細胞和活性介質一同形成穩定的腫瘤免疫微環境，保護腫瘤組織逃脫機體的免疫監視并促進腫瘤進展。腫瘤細胞具有很強的異質性和增殖能力，而其在生長過程中的高突變率使我們在腫瘤治療過程中，很難能夠找到在多種腫瘤上或者在同一種腫瘤類型的不同病人之間穩定表達的特異性腫瘤抗原。

腫瘤微環境中具有低氧和酸化的特質，低氧和酸化是從良性腫瘤發展為轉移生長的惡性腫瘤的重要原因。其中酸化對腫瘤的發展有三方面的影響：即增加對化療的耐受性、增加突變率、增強浸潤性。

骨髓(造血)微環境是指可以調控造血細胞增殖、分化和功能的網絡系統，包括細胞成分和細胞產物。細胞成分有基質細胞和附屬細胞，基質細胞有成纖維細胞、成骨細胞、巨噬細胞、內皮細胞等；附屬細胞主要為單核細胞和淋巴細胞、骨髓基質細胞可以產生和沉淀復雜的細胞外基質。

低pH值插入肽(pH low insertion peptide，PHLIP)可以在腫瘤微環境的酸性環境下可以發生從無規則卷曲到α螺旋的構象轉化，而這種構象轉化可以使其將自己插入到腫瘤的細胞膜上，C端在細胞內，N端在細胞外。這種在低pH值下的自組裝已經被證明可以在多種實體瘤上有效的發生。

對于腫瘤和癌癥治療，早期會選擇利用手術清除加以放療或者化療(紫杉醇等)的方式進行治療；后來開始針對腫瘤特異性靶點完成靶向治療，比如2004年美國FDA批準的第一個抗腫瘤血管生成藥物—安維汀以及2015年第三代肺癌藥奧希替尼上市；近期人們開始了對調節人體免疫對腫瘤的治療過程，在2018年諾貝爾醫學獎頒給了美國的詹姆斯.艾利森和日本的本庶佑，以表彰他們在癌癥免疫療法(CTLA-4、PD-1的發現)上做出的開創性工作。以及CAR-T技術應用到血液瘤的治療中，但是均因各種原因最后的成效并沒有那么令人滿意，所以我們選擇了對于腫瘤細胞殺傷更加具有潛力的NK細胞。

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發明內容