[發明專利]一種風鈴草的植株再生方法

在審

• 申請號: 202010164880.1
• 申請日: 2020-03-11
• 公開（公告）號: CN111374052A
• 公開（公告）日: 2020-07-07
• 發明（設計）人: 趙銀萍;杜國榮;孟長軍;宋旖;李娜
• 申請（專利權）人: 西安文理學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;A01G24/12;A01G24/28
• 代理公司: 西安啟誠專利知識產權代理事務所(普通合伙) 61240
• 代理人: 馮亮

1.一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、將風鈴草種子用無菌水浸泡，待種子長出胚根后，將露出胚根的種子用0.2％H₂O₂滅菌2min～3min，然后將滅菌后的種子接種于水瓊脂培養基上萌發，得到帶有子葉和幼嫩真葉的幼苗，切下子葉或幼嫩真葉作為外植體備用；

或者將風鈴草種子播種于裝有85wt％泥炭、10wt％珍珠巖和5wt％蛭石的混合基質的育苗盆中萌發，得到帶有子葉和幼嫩真葉的幼苗，將幼苗用75％的酒精浸泡30s，用無菌水漂洗，再用10％的NaClO滅菌5min，無菌水沖洗，無菌吸水紙吸干表面水分，切下子葉或幼嫩真葉作為外植體備用；

步驟二、將步驟一中所述外植體置于含有TDZ、NAA和BA的MS培養基中，在避光條件下培養20天，獲得愈傷組織；

步驟三、將步驟二中所述愈傷組織經繼代培養后轉入光下培養，見光三天后愈傷組織開始轉綠，繼續見光培養；

步驟四、將步驟三中轉綠后的愈傷組織轉接到芽分化培養基上培養，分化出叢生不定芽，待不定芽長大至1cm～1.5cm時，分離不定芽并將分離的不定芽接種至生根培養基上進行生根培養，得到組培苗；

步驟五、將步驟四中所述組培苗移栽于草炭和沙的基質中，溫室生長，得到風鈴草植株。

2.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟一中所述水瓊脂培養基中瓊脂的含量為6g/L。

3.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟二中含有TDZ、NAA和BA的MS培養基中TDZ的含量為1.5mg/L，NAA的含量為0.3mg/L，BA的含量為1.5mg/L。

4.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟三中所述繼代培養的時間為9天。

5.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟四中所述芽分化培養基為含有NAA和6-BA的MS培養基，芽分化培養基中NAA的含量為0.03mg/L，6-BA的含量為0.5mg/L。

6.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟四中所述生根培養基為含有AC、瓊脂和蔗糖的1/2MS培養基，生根培養基中AC的質量百分含量為0.1％，瓊脂的質量百分含量為0.6％，蔗糖的質量百分含量為2％，生根培養基的pH值為6.0～6.5。

7.根據權利要求1所述的一種風鈴草的植株再生方法，其特征在于，步驟五中所述草炭和沙的基質中草炭和沙的質量比為1:1。