1.一種融合蛋白,所述融合蛋白自N端至C端依次包括第一nCas9片段、嵌合插入片段、第二nCas9片段和兩個UGI片段,所述嵌合插入片段選自APOBEC1片段或APOBEC3A片段;
所述第一nCas9片段的氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示;以及,所述第二nCas9片段的氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示。
2.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述APOBEC1片段的氨基酸序列如SEQID NO. 3所示。
3.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述APOBEC3A片段的氨基酸序列如SEQID NO. 4所示。
4.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述UGI片段的氨基酸序列如SEQ IDNO. 5所示。
5.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白還包括核定位信號片段。
6.如權(quán)利要求5所述的融合蛋白,其特征在于,所述核定位信號片段的氨基酸序列如SEQ ID NO. 6所示。
7.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白還包括柔性連接肽片段。
8.如權(quán)利要求7所述的融合蛋白,其特征在于,所述柔性連接肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO. 7或SEQ ID NO. 8所示。
9.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo. 9~10其中之一所示。
10.一種分離的多核苷酸,編碼如權(quán)利要求1~9任一權(quán)利要求所述的融合蛋白。
11.一種構(gòu)建體,所述構(gòu)建體含有如權(quán)利要求10所述的分離的多核苷酸。
12.一種表達系統(tǒng),所述表達系統(tǒng)含有如權(quán)利要求11所述的構(gòu)建體或基因組中整合有外源的如權(quán)利要求10所述的多核苷酸。
13.如權(quán)利要求12所述的表達系統(tǒng),其特征在于,所述表達系統(tǒng)的宿主細胞選自真核細胞。
14.如權(quán)利要求13所述的表達系統(tǒng),其特征在于,所述真核細胞選自小鼠細胞或人細胞。
15.如權(quán)利要求14所述的表達系統(tǒng),其特征在于,所述真核細胞選自小鼠腦神經(jīng)瘤細胞、人胚胎腎細胞、或人宮頸癌細胞、人結(jié)腸癌細胞或人骨肉瘤細胞。
16.如權(quán)利要求15所述的表達系統(tǒng),其特征在于,所述真核細胞選自N2a細胞、HEK293FT細胞、Hela細胞、HCT116細胞、或U2OS細胞。
17.如權(quán)利要求1~9任一權(quán)利要求所述的融合蛋白、如權(quán)利要求10所述的分離的多核苷酸、如權(quán)利要求11所述的構(gòu)建體或如權(quán)利要求12~16任一權(quán)利要求所述的表達系統(tǒng)在基因編輯中的用途。
18.如權(quán)利要求17所述的用途,其特征在于,所述用途具體為在真核生物的基因編輯中的用途。
19.一種堿基編輯體系,包括如權(quán)利要求1~9任一權(quán)利要求所述的融合蛋白,所述堿基編輯體系還包括sgRNA。
20.一種基因編輯方法,包括:通過如權(quán)利要求1~9任一權(quán)利要求所述的融合蛋白、或如權(quán)利要求19所述的堿基編輯體系進行基因編輯。