[發(fā)明專利]一種準(zhǔn)確檢測新生隱球菌的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010159851.6 | 申請日: | 2020-03-10 |
| 公開(公告)號: | CN111690760A | 公開(公告)日: | 2020-09-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 不公告發(fā)明人 | 申請(專利權(quán))人: | 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京成實知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11724 | 代理人: | 陳永虔 |
| 地址: | 100038 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 準(zhǔn)確 檢測 新生 球菌 方法 | ||
1.一種準(zhǔn)確檢測新生隱球菌的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟
步驟1)選擇待測樣本;
步驟2)提取DNA;
步驟3)制備實時熒光PCR反應(yīng)體系;
步驟4)熒光PCR擴(kuò)增。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述熒光PCR反應(yīng)體系包括引物和探針。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述引物由SEQ ID NO:1所示的上游引物和SEQ ID NO:2所示的下游引物組成;所述探針為檢測新生隱球菌的探針。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述探針為FAM 5’-TCGGATGATGATCCTCAGACCGACC-3’BHQ1。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述熒光PCR反應(yīng)體系為:
Reagents Volume (ul) 10×ExTag Buffer 2.5ul Original DNA 1ul dNTP 2ul 探針(10nmol/ml) 0.5ul 上游引物(10nmol/ml) 0.5ul 下游引物(10nmol/ml) 0.5ul TaKara ExTag enzyme (5U/ul) 0.25ul Ultrapure water 17.25ul
。
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