[發明專利]一種尿酸檢測專用微流控紙芯片及檢測分析方法

在審

• 申請號: 202010157472.3
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111443082A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 劉青葉;張劍;苗延青;靖會
• 申請（專利權）人: 西安醫學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;B01L3/00
• 代理公司: 西安弘理專利事務所 61214
• 代理人: 燕肇琪

1.一種專用于尿酸測定的紙質微流控芯片，其特征在于：所述紙質微流控芯片由紙基和沉積在紙基上的疏水材料構成；所述的紙基采用空隙率低、孔徑小、且分布均勻的色譜紙，或者采用硝基纖維濾膜，以適用血尿酸和尿尿酸的檢測；所述的疏水材料采用蠟；使用噴蠟打印機，通過電腦安裝的繪圖軟件，根據所設計得微流控紙芯片的微通道網絡，在色譜紙上根據設計好的微流控紙芯片的微通道網絡打印紙芯片文檔，再于熱壓機上得測試用紙芯片。

2.根據權利要求1所述的一種專用于尿酸測定的紙質微流控芯片，其特征在于：所述的紙基孔隙率在65～85％之間；所述的紙基孔徑在10μm～11μm之間；所述的色譜紙為：厚度180μm，基本重量88g/m²，空氣流速10.5s/100mL/in²，灰份含量0.06％，拉伸模量39.1N/15mm，最低α-纖維素含量98％的纖維素紙；所述的硝基纖維濾膜為：孔徑0.7～0.8μm，厚度105～140μm，爆裂強度＞2psi，重量3.6～5.5mg/cm²，最高操作溫度80℃，孔隙率66～84％，經蒸汽高壓滅菌的親水性濾膜。

3.根據權利要求1、2任一所述的一種專用于尿酸測定的紙質微流控芯片，其特征在于：樣品加載區I和II直徑4mm，檢測區III直徑6mm，I區與III區之間通道長度7mm，通道寬度2mm，尿酸溶液和顯色劑分別在I區和II區進行加載，在毛細作用下相向移動，于III區混合并反應。

4.一種用紙質微流流控芯片對尿酸進行含量檢測的方法，其特征在于：采取微流控紙芯片技術對尿酸進行含量測定，利用尿酸的還原性，以三氯化鐵為氧化劑組成氧化還原體系，以鄰二氮菲對反應產物Fe²⁺進行顯色，根據顯色強度對尿酸含量進行檢測，包括以下步驟：

步驟1：采用繪圖軟件，設計出微流控紙芯片的微通道網絡，使用噴蠟打印機、在色譜紙上打印設計好的紙芯片文檔，再于熱壓機上加熱得實驗用紙芯片；

步驟2：檢測前配制尿酸儲備液、磷酸緩沖液、FeCl₃溶液和鄰二氮菲溶液；

步驟3：檢測前制作尿酸標準曲線；

步驟4：繪制RGB(紅R、綠G、藍B三個顏色通道的疊加)值與濃度的曲線；

步驟5：分別在反應時間1～20min、顯色劑pH5～8、尿酸和三氯化鐵比例1:1.2～1:2條件下進行檢測，得到最佳檢測條件；

步驟:6：對動物血清中尿酸的含量進行檢測；

步驟7：不加尿酸溶液的血清作為空白對照號，加入不同尿酸標準品后所得樣品溶液分別與FeCl₃混合反應后，在紙芯片上與pH7.4鄰二氮菲顯色劑等比例反應；

步驟8：計算血清中的尿酸的回收率。

5.根據權利要求4所述的一種用紙質微流流控芯片對尿酸進行含量檢測的方法，其特征在于：完成步驟3、4、5，所需要確定的最低檢測限試驗具體過程為：取尿酸儲備液分別稀釋后并標號，以1:1.6的比例與三氯化鐵反應10min，在紙芯片上與pH7.4鄰二氮菲顯色劑等比例反應，得到紙芯片檢測尿酸的最低檢測限。

6.根據權利要求4所述的一種用紙質微流流控芯片對尿酸進行含量檢測的方法，其特征在于：完成步驟3、4、5，所需要確定的溶液干擾離子的影響的具體過程為：取尿酸儲備液將其稀釋成一定濃度的尿酸溶液，取0.5mL離心管14個分別標號0-13，0號不加共存離子，1-13號分別與1000倍量的氯化鈉溶液、氯化鉀溶液、硫酸鈉溶液、亞硫酸鋅溶液、硝酸鋁溶液，100倍量的氯化銨溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液，10倍量的硫酸鋅溶液、氯化鈣溶液、氯化鋇溶液、無水碳酸鈉溶液，等倍量的維生素C溶液和多巴胺溶液，干擾離子分別以1:1.6的比例與FeCl₃反應10min，在紙芯片上與pH7.4鄰二氮菲顯色劑等比例反應。