[發明專利]一種中藥復方制劑指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

有效

• 申請號: 202010157005.0
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111289648B
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 張愛軍;李帥;唐玉;朱紅梅;毛九州;陳東輝
• 申請（專利權）人: 四川省中醫藥科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/54;G01N30/60;G01N30/86
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 趙曉琳

1.一種中藥復方制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)采用甲醇對中藥復方制劑進行超聲提取，得到供試品溶液；所述中藥復方制劑包括干蟾皮、壁虎、金蕎麥、喜樹果、西洋參、仙鶴草和靈芝；所述干蟾皮、壁虎、金蕎麥、喜樹果、西洋參、仙鶴草和靈芝的質量比為1～9:1～9:30～50:20～40:6～16:10～30:6～24；

(2)采用高效液相色譜法對供試品溶液進行測試，根據《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2012A版》，由得到的色譜數據生成中藥復方制劑指紋圖譜；

所述高效液相色譜法的色譜條件為：

色譜柱：C₁₈色譜柱；

檢測波長：200～220nm；

流動相：流動相A為體積分數0.05％～0.3％的磷酸水溶液，流動相B為乙腈；

所述色譜條件還包括：

流速：0.5～1.5mL/min；

柱溫：15～35℃；

色譜柱規格：250mm×4.6mm，5μm；

進樣體積：5～20μL；

進樣濃度：0.01g/mL～1.00g/mL；

洗脫方式為梯度洗脫，所述梯度洗脫的洗脫程序如表1所示：

表1梯度洗脫程序

還包括配制混合對照品溶液，所述混合對照品溶液的配制方法包括以下步驟：將人參皂苷Re、人參皂苷Rg₁、喜樹堿、人參皂苷Rb₁、表兒茶素和蟾蜍噻嚀對照品溶于甲醇中，得到混合對照品溶液；

采用與供試品溶液相同的高效液相色譜條件對混合對照品溶液進行測試，得到混合對照品溶液的色譜圖；將混合對照品溶液的色譜圖與得到的中藥復方制劑指紋圖譜進行對比，用于指認中藥復方制劑指紋圖譜中的色譜峰。

2.根據權利要求1所述的中藥復方制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備方法包括以下步驟：

(a)將中藥復方制劑與甲醇混合后超聲，然后過濾，濾液減壓濃縮，得到濃縮液；所述超聲的功率為200～400W，頻率為30～50kHz，時間為20～60min；

(b)采用甲醇水溶液將濃縮液進行定容，然后將定容液中的上清液進行微孔濾膜過濾，得到供試品溶液。

3.根據權利要求2所述的中藥復方制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟(b)中甲醇水溶液的體積濃度為10％～100％。

4.根據權利要求2所述的中藥復方制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述步驟(b)中微孔濾膜的孔徑為0.2～0.5μm。