[發明專利]葡糖鞘氨醇的檢測方法

在審

• 申請號: 202010156913.8
• 申請日: 2020-03-09
• 公開（公告）號: CN111289647A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 唐誠芳;黃永蘭
• 申請（專利權）人: 廣州市婦女兒童醫療中心(廣州市婦幼保健院;廣州市兒童醫院;廣州市婦嬰醫院;廣州市婦幼保健計劃生育服務中心)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 孔令聰

1.一種葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

獲取干血斑樣本；

向所述干血斑樣本中加入含有葡糖鞘氨醇同位素內標的乙腈水溶液，振蕩即得待測樣品；

采用液相色譜串聯質譜法檢測所述待測樣品。

2.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中乙腈與水的體積比為50:(45～55)。

3.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜串聯質譜法的液相色譜條件包括：色譜柱：C18柱，規格為2.1×50mm,1.7μm；流動相A：體積濃度為0.09％～0.11％的甲酸水溶液，流動相B：體積濃度為0.09％～0.11％的甲酸乙腈溶液；采用梯度洗脫。

4.根據權利要求3所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫包括如下程序：

0～2min：流動相B的體積百分比由45％上升至65％，流動相A的體積百分比由55％降低至35％；

2min～2.1min：流動相B的體積百分比由65％B上升至100％，流動相A的體積百分比由35％降低至0；

2.1min～4min：流動相B的體積百分比保持100％不變，流動相A的體積百分比保持0不變；

4min～4.1min：流動相B的體積百分比由100％降低至45％，流動相A的體積百分比由0上升至55％；

4.1min～5min：流動相B的體積百分比保持45％不變，流動相A的體積百分比保持55％不變。

5.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜串聯質譜法的液相色譜條件還包括：流速：0.3mL/min～0.5mL/min；進樣量：5μL～10μL；柱溫：40℃～50℃。

6.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜串聯質譜法的質譜條件包括：

離子源：電噴霧離子源，正離子模式；

毛細管電壓：0.6KV～1.0KV；

錐孔電壓：30V～40V；

碰撞電壓：15V～30V；

離子源溫度：145℃～155℃；

脫溶劑氣溫度：550℃～650℃；

脫溶劑氣流量：800L/Hr～1000L/Hr；

錐孔氣流量：45L/Hr～55L/Hr；

離子掃描模式：多重反應監測模式。

7.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中的葡糖鞘氨醇同位素內標為¹³C₆-葡糖鞘氨醇。

8.根據權利要求7所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜串聯質譜法的質譜條件還包括：葡糖鞘氨醇的檢測離子通道為462.3264.2和462.3282.2，其中462.3264.2為定量離子通道，462.3282.2為定性離子通道；¹³C₆-葡糖鞘氨醇的檢測離子通道為468.3264.3和468.3282.3，其中468.3264.3為定量離子通道，468.3282.3為定性離子通道。

9.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述干血斑樣本的直徑為3mm～3.5mm；所述乙腈水溶液的加入量為80μL～100μL。

10.根據權利要求1所述的葡糖鞘氨醇的檢測方法，其特征在于，所述振蕩的時間為20min～50min，速度為600rpm～700rpm。