[發明專利]一種檢測miRNA159c的高靈敏光電化學生物傳感器及其制備和檢測方法

有效

• 申請號: 202010153229.4
• 申請日: 2020-03-06
• 公開（公告）號: CN111272848B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 石康中;毛昌杰;劉申婷;柳星培;陳京帥;金葆康
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 盧敏

1.一種檢測miRNA159c的高靈敏光電化學生物傳感器，其特征在于：所述光電化學生物傳感器是在FTO導電玻璃電極的表面固定有Ti₃C₂：CdS納米復合材料作為光電材料，在所述Ti₃C₂：CdS納米復合材料上通過硫-鎘鍵固定有可與目標miRNA159c鏈發生鏈雜交的DNA鏈；

所述Ti₃C₂：CdS納米復合材料是以Ti₃C₂納米片為基體，在Ti₃C₂納米片表面均勻負載有CdS量子點。

2.根據權利要求1所述的高靈敏光電化學生物傳感器，其特征在于：在所述光電化學生物傳感器表面滴加待測miRNA159c樣品并孵育，使DNA鏈與待測miRNA159c樣品完全雜交；然后再滴加TMPyP作為光敏劑并孵育，以增強光電流，獲得待測傳感器電極；

對所述待測傳感器電極進行光電化學測試，獲得待測miRNA159c樣品的光電流強度，利用光電流強度與miRNA159c樣品濃度的標準關系曲線，判斷待測miRNA159c樣品的濃度。

3.根據權利要求1所述的高靈敏光電化學生物傳感器，其特征在于：所述DNA鏈序列為5'-SH-TGGAGCTCCCTTCAATCCAAT-3'。

4.根據權利要求1所述的高靈敏光電化學生物傳感器，其特征在于：所述Ti₃C₂：CdS納米復合材料是由Ti₃C₂納米片和CdS量子點在去離子水中，通過超聲反應，從而獲得。

5.一種權利要求1～4中任意一項所述高靈敏光電化學生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1、將FTO導電玻璃依次用去離子水和乙醇超聲清洗，然后在60℃條件下干燥過夜，獲得干凈的FTO導電玻璃電極；

步驟2、將5mg Ti₃C₂納米片分散在5mL去離子水中，超聲30分鐘，再加入325μL的CdS量子點分散液，繼續超聲2～3小時，獲得Ti₃C₂：CdS納米復合材料的分散液；

步驟3、將30μL Ti₃C₂：CdS納米復合材料的分散液均勻滴在干凈的FTO導電玻璃電極表面，室溫下靜置干燥8～10小時，然后用離子水漂洗、N₂吹干，再滴加5μL濃度為1×10^-6mol·L^-1的殼聚糖的水溶液，室溫干燥1小時，再用離子水漂洗、N₂吹干，即完成納米復合材料的固定；

步驟4、將30μL濃度為2×10^-6mol·L^-1的DNA溶液滴加到電極表面，4℃下孵育12小時，然后用TE緩沖溶液沖洗、N₂吹干；再滴加20～30μL巰基乙醇并4℃靜置1小時，再次用TE緩沖溶液沖洗、N₂吹干，即完成高靈敏光電化學生物傳感器的制作。