[發明專利]基于常規引物的針對串聯重復序列的恒溫擴增體系、擴增方法及常規引物對有效
| 申請號： | 202010152624.0 | 申請日： | 2020-03-06 |
| 公開（公告）號： | CN111269969B | 公開（公告）日： | 2023-08-29 |
| 發明（設計）人： | 范小勇;吳康;羅道良 | 申請（專利權）人： | 上海市公共衛生臨床中心 |
| 主分類號： | C12Q1/6844 | 分類號： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/32 |
| 代理公司： | 上海段和段律師事務所 31334 | 代理人： | 李佳俊;郭國中 |
| 地址： | 201514 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 常規 引物 針對 串聯 重復 序列 恒溫 擴增 體系 方法 | ||
1.一種基于常規引物的針對串聯重復序列的恒溫擴增體系，其特征在于，所述恒溫擴增體系包括具有串聯重復序列的DNA模板、DNA聚合酶和常規引物對，所述DNA聚合酶為具有鏈置換活性的
所述具有串聯重復序列的DNA模板為重復DNA序列rDs7或結核分枝桿菌H37Rv基因組DNA；
當重復DNA序列rDs7為模板時，所述常規引物對為：
正向引物：5'?GAACTTCACCAGCACACTGA?3'
反向引物：5'?AGCCACGATCTTTGACTTGT?3'
當結核分枝桿菌H37Rv基因組DNA為模板時，所述常規引物對為：
正向引物：5'?GCCGGCGACGATGCAGAGC?3'
反向引物：5'?GCGCCGCTCCTCCTCATCG?3'；
或
正向引物：5'?GCCGGCGACGATGCAGAGC?3'
反向引物：5'?GCCGGCGACGATGCAGAGC?3'；
所述重復DNA序列rDs7由7個高度同源DNA序列rDs7-1～rDs7-7按照先后順序拼接而成；rDs7-1的序列如SEQ?ID?NO：1所示；rDs7-2的序列如SEQ?ID?NO：2所示；rDs7-3的序列如SEQ?ID?NO：3所示；rDs7-4的序列如SEQ?ID?NO：4所示；rDs7-5的序列如SEQ?ID?NO：5所示；rDs7-6的序列如SEQ?ID?NO：6所示；rDs7-7的序列如SEQ?ID?NO：7所示；
當進行實時恒溫擴增時，需在恒溫擴增體系中另加入終濃度為0.8×的SYBR?Gold核酸熒光染料。
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