[發(fā)明專利]追蹤慢性進(jìn)行性肝炎和肝纖維化程度的試劑盒及其用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010151845.6
• 申請(qǐng)日: 2020-03-06
• 公開（公告）號(hào): CN112748246A
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 車旺祚;徐鉉孝;鄭美京;趙在賢;鄭美淑;尹多喜;李明憲;金成洪;樸泌相
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 艾斯生物醫(yī)藥株式會(huì)社
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/576
• 代理公司: 上海弼興律師事務(wù)所 31283
• 代理人: 薛琦;黃益澍

本發(fā)明用于迅速簡便地檢測早期的肝臟疾病，更具體地，涉及一種診斷試劑盒及其用途，所述診斷試劑盒使用針對(duì)α1?酸性糖蛋白的單克隆抗體，通過該抗體測量作為肝損傷標(biāo)記的去唾液酸?α1?酸性糖蛋白的濃度，以此追蹤肝臟疾病的早期階段即慢性進(jìn)行性肝炎及肝纖維化程度。另外，本發(fā)明提供一種用于從血液樣品中特異性測定慢性進(jìn)行性肝炎和肝纖維化程度的試劑盒及免疫色譜條，其包含保藏號(hào)為KCTC13998BP的融合細(xì)胞系產(chǎn)生的針對(duì)α1?酸性糖蛋白的單克隆抗體AGP601和與辣根過氧化物酶結(jié)合從而與去唾液酸?α1?酸性糖蛋白特異性結(jié)合的HRP?RCAII結(jié)合物或GOLD(金)?RCAII結(jié)合物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物診斷試劑領(lǐng)域，本發(fā)明涉及一種追蹤慢性進(jìn)行性肝炎和肝纖維化程度的試劑盒及其用途，具體地，所述診斷試劑盒使用α1-酸性糖蛋白的單克隆抗體，通過該抗體測量肝細(xì)胞損傷標(biāo)記物去唾液酸-α1-酸性糖蛋白(AsAGP)的濃度，以此用于追蹤肝病的早期階段即慢性進(jìn)行性肝炎及肝纖維化程度。

背景技術(shù)

為了準(zhǔn)確地早期診斷包括癌癥在內(nèi)的各種嚴(yán)重疾病，使用了各種血清學(xué)生物標(biāo)記物進(jìn)行篩選，并且尋找更好的血清學(xué)生物標(biāo)記物的研究仍在繼續(xù)。肝活檢是診斷肝纖維化的標(biāo)準(zhǔn)診斷方法，但是由于組織采集錯(cuò)誤而存在準(zhǔn)確性問題，由于侵入性手術(shù)的風(fēng)險(xiǎn)和并發(fā)癥的產(chǎn)生、檢查者之間的熟練程度不同，它用于確診肝病是有限制的。特別地，術(shù)后疼痛相對(duì)普遍，并且也曾有與檢測相關(guān)的死亡報(bào)道。由于肝活檢引起的許多問題，需進(jìn)行肝組織活檢的醫(yī)生和接受活檢的患者都有些抗拒，當(dāng)需要重復(fù)檢查時(shí)，肝組織活檢變得更加困難。由于這個(gè)侵入性問題，以非侵入性方式預(yù)測肝纖維化的方法正在被研發(fā)中。

替代方法包括腹部超聲檢查和使用血清標(biāo)記物的血清測試，目前，使用肝纖維化掃描的肝彈性測試被用作肝纖維化的非侵入性測量。

肝細(xì)胞即使有疾病也具有很強(qiáng)的再生功能，如果健康部位占正常組織的20％到30％，它們將幾乎保持正常的功能。而用血清學(xué)診斷肝病,硬度病變?cè)诟喂δ軝z查時(shí)有時(shí)也會(huì)顯示無異常，多個(gè)測試結(jié)果之間相互無關(guān)聯(lián)性的情況較多，因此需要通過各種測試進(jìn)行全面檢查。很難對(duì)于慢性肝病患者預(yù)測其嚴(yán)重纖維化或肝硬化的進(jìn)展，作為標(biāo)準(zhǔn)測試方法的肝活檢可能會(huì)通過侵入性方法引起與手術(shù)相關(guān)的并發(fā)癥。

使用肝纖維化掃描(FibroScan)進(jìn)行肝彈性測試的優(yōu)點(diǎn)是可以通過非侵入的方式測量肝臟彈性來判斷肝纖維化，但是根據(jù)患者身體狀態(tài)彈性波未到達(dá)肝細(xì)胞以及波探頭(wave probe)位置不正確的情況下無法進(jìn)行測量，并且根據(jù)受測者的年齡和高身體質(zhì)量指數(shù)，也存在難以進(jìn)行肝彈性測試的問題。

由于這些問題，使用幾種新的血清學(xué)生物標(biāo)記物來診斷肝纖維化階段的研究仍在進(jìn)行中，并且需要開發(fā)出通過臨床療效較高的新型血清學(xué)生物標(biāo)記物可以準(zhǔn)確診斷肝纖維化階段的診斷試劑。

慢性肝病是一種嚴(yán)重的疾病，預(yù)后較差，將來可能導(dǎo)致肝硬化，并且與發(fā)生率相比死亡率很高。特別是在包括韓國在內(nèi)的肝炎病毒攜帶者較多的亞洲，發(fā)病率較高，因此，評(píng)價(jià)肝纖維化的程度是用于慢性肝病的早期診斷的重要部分。

在慢性肝炎中，若肝細(xì)胞炎癥和壞死持續(xù)存在，則發(fā)生肝纖維化，肝纖維化進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化。為了在慢性肝病過程中更準(zhǔn)確地評(píng)估和診斷肝纖維化，需要研發(fā)出血清學(xué)肝纖維化診斷的生物標(biāo)記物，作為對(duì)目前使用的通過肝彈性測試測量肝纖維化程度的肝彈性測試(FibroScan，MRE)的補(bǔ)充。

被開發(fā)的肝細(xì)胞損傷生物標(biāo)記物去唾液酸-α1-酸性糖蛋白(AsAGP)對(duì)追蹤檢查慢性進(jìn)行性肝炎和肝纖維化的程度具有很高的特異性，因此可以推斷它在診斷和治療慢性肝病患者方面具有很高的臨床實(shí)用性。

在現(xiàn)有技術(shù)中，通過測量血液中所含的去唾液酸-α1-酸性糖蛋白的濃度來診斷已超過慢性肝炎進(jìn)展的肝硬化和肝癌的方法是已知的，但是現(xiàn)有技術(shù)是針對(duì)肝病已經(jīng)進(jìn)展到肝癌的程度才能進(jìn)行診斷的方法，它難以診斷作為本發(fā)明的目的的肝臟疾病的初期進(jìn)展即慢性肝炎和肝纖維化的程度。