[發明專利]一種血液中花生四烯酸的檢測方法

有效

• 申請號: 202010151585.2
• 申請日: 2020-03-06
• 公開（公告）號: CN111398440B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 戚歡陽;羅友華;黃亦琦;李強
• 申請（專利權）人: 廈門市健康醫療大數據中心（廈門市醫藥研究所）
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;秦彥蘇

1.一種血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：包括：

1）超濾膜絲用有機溶劑清洗，室溫干燥后，浸沒于待測血樣中，靜置30～60 min后取出，室溫干燥，得到富集了目標分析物的待測超濾膜絲；所述超濾膜絲為聚氯乙烯超濾膜絲；所述有機溶劑為甲醇或丙酮；

2）將待測超濾膜絲置于衍生化試劑中，于65～75 ℃同步進行洗脫和衍生化反應30～50 min，反應完成后所得的反應液經離心后，獲得上清液；所述衍生化試劑為N,O-雙(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺BSTFA或N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺MSTFA；

3）對步驟2）得到的上清液采用氣相色譜質譜聯用法進行檢測；所述氣相色譜質譜聯用法的檢測條件為：安捷倫Agilent 7890A GC/5977B MSD，配備電子碰撞離子源，HP-5 MS色譜柱，25～35 m×0.2～0.3 mm i.d.，0.2～0.3 μm薄膜厚度，使用氦氣作為載氣并保持在1.1～1.3 mL· min^-1的流速；MS傳輸線加熱器為278～282 ℃；離子源溫度為248～252 ℃；四級桿溫度為238～242 ℃；EI電壓為68～72 eV；GC-MS進樣口溫度為248～252 ℃； 柱溫箱溫度程序如下：初始溫度59～61 ℃保持1.9～2.1 min，以9～11 ℃·min^-1升至278～282℃并保持19.5～20.5 min；樣品以分流模式進樣，分流比為1：90～110。

2.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述超濾膜絲的長度為0.5～2.0 cm。

3.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述聚氯乙烯超濾膜絲的內徑為0.8～1.2 mm，外徑為1.6～1.7 mm，孔徑為0.01～0.03 μm。

4.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述步驟1）中，所述清洗方式為浸泡清洗或超聲清洗。

5.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述待測血樣來源于高血脂的對象。

6.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述待測血樣來源于患有高脂血癥或急性心肌梗死的對象。

7.根據權利要求1所述的血液中花生四烯酸的檢測方法，其特征在于：所述衍生化試劑的加入量為0.1～1 mL。