[發(fā)明專利]一種活性蛋白HMEI-A、活性蛋白HMEI-A的編碼基因及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010147473.X
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111454352B
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賴仞;龍承波;周夢;許寬宏;吳飛龍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所
• 主分類號: C07K14/815
• 分類號: C07K14/815;C12N15/15;A61K38/52;A61P29/00;A61P19/02;A61P11/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 呂紀(jì)濤

本發(fā)明提供了一種活性蛋白HMEI?A、活性蛋白HMEI?A的編碼基因及應(yīng)用，屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，所述活性蛋白HMEI?A的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本發(fā)明的活性蛋白HMEI?A具有中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制活性，能夠抑制中性粒細(xì)胞誘捕網(wǎng)形成，進(jìn)而發(fā)揮抗炎作用。本發(fā)明的活性蛋白HMEI?A能夠用于制備抗炎藥物，用于治療炎癥性疾病。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種活性蛋白HMEI-A、活性蛋白HMEI-A的編碼基因及應(yīng)用。

背景技術(shù)

菲牛蛭在廣西俗稱金邊螞蟥，是廣西特色的藥用動(dòng)物資源。菲牛蛭在吸食宿主血液時(shí)，唾液腺會(huì)分泌大量活性成分，這些成分里包含抗炎因子、蛋白酶抑制劑、抗凝血因子及鎮(zhèn)痛因子等。菲牛蛭來源的活性蛋白HMEI-A具有抗炎作用在現(xiàn)有技術(shù)中還沒有報(bào)道過。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種活性蛋白HMEI-A、活性蛋白HMEI-A的編碼基因及應(yīng)用，本發(fā)明的活性蛋白HMEI-A具有中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制活性，具有抗炎作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種活性蛋白HMEI-A，所述活性蛋白HMEI-A的氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

優(yōu)選的，所述活性蛋白HMEI-A的氨基酸序列還包括與SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列相比具有1～5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加的氨基酸序列。

優(yōu)選的，所述活性蛋白HMEI-A的氨基酸序列還包括與SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列相比具有至少80％同一性的氨基酸序列。

本發(fā)明還提供了上述方案所述活性蛋白HMEI-A的編碼基因，所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本發(fā)明還提供了上述方案所述的活性蛋白HMEI-A或者所述的編碼基因在制備中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述方案所述的活性蛋白HMEI-A或者所述的編碼基因在制備抑制中性粒細(xì)胞誘捕網(wǎng)形成的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了上述方案所述的活性蛋白HMEI-A或者所述的編碼基因在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述抗炎藥物治療的疾病包括急性肺炎或關(guān)節(jié)炎。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明提供了一種活性蛋白HMEI-A，所述活性蛋白HMEI-A的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。中性粒細(xì)胞在機(jī)體免疫應(yīng)答中發(fā)揮非常重要的作用，其作為人體免疫系統(tǒng)的重要防線。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)損傷或病原菌侵染時(shí)，中性粒細(xì)胞會(huì)迅速招募到損傷組織，并通過脫顆粒和吞噬發(fā)揮組織修復(fù)和清除病原菌作用。招募活化的中性粒細(xì)胞還通過釋放誘捕網(wǎng)(Neutrophil extracellulartraps，NETs)殺傷病原菌和參加組織修復(fù)，且在該過程中，中性粒細(xì)胞彈性(Neutrophil elastase)蛋白酶發(fā)揮關(guān)鍵作用。在抑制其酶活性情況下誘捕網(wǎng)形成過程將會(huì)被完全抑制。本發(fā)明的活性蛋白HMEI-A具有中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制活性，能夠抑制中性粒細(xì)胞誘捕網(wǎng)形成，進(jìn)而發(fā)揮抗炎作用。本發(fā)明的活性蛋白HMEI-A能夠用于制備抗炎藥物，用于治療炎癥性疾病。

附圖說明

圖1為HMEI-A開放閱讀框，圖中所示HMEI-A基因(SEQ ID NO.1)編碼的HMEI-A蛋白(SEQ ID NO.2)，灰色背景標(biāo)出部分為HMEI-A信號肽，其余部分為HMEI-A成熟蛋白即本發(fā)明中所述中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑HMEI-A；

圖2為HMEI-A的體外抗炎活性分析結(jié)果，圖2中的a、b、c和d分別為PBS陰性對照組、100ng/ml PMA誘導(dǎo)組、100ng/ml PMA誘導(dǎo)且添加10μg/ml HMEI-A組和100ng/ml PMA誘導(dǎo)且添加50μg/ml分離純化前粗蛋白組中中性粒細(xì)胞誘捕形成情況；