[發明專利]一種利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法

有效

• 申請號: 202010147431.6
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN111248085B
• 公開（公告）日: 2022-09-06
• 發明（設計）人: 苗杰;陳甘牛;趙瑩;路兆軍
• 申請（專利權）人: 煙臺市林業科學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京禹為知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32272
• 代理人: 王曉東

本發明公開了一種利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法，其包括，將苦糖果越冬枝條的花芽去掉外表皮，留存黃綠色的花芽幼嫩部位；將所述花芽幼嫩部位消毒，接種至培養基上培養；其中，所述培養基為MS基本培養基，附加6?BA激素和/或IBA激素，所述6?BA激素與所述IBA激素的質量比為1：(1～2)；所述培養的溫度為26±1℃，光照強度為4000～6000lx，光照時長為12h的恒溫培養箱進行培養15～25天。所述消毒，其為利用酒精、次氯酸鈉、無菌水、升汞進行消毒。本發明通過對不同激素濃度進行優選，首次提出利用苦糖果越冬花芽作為供試材料促進其愈傷組織形成的方法，為苦糖果無性繁育方式填補空白。

技術領域

本發明屬于植物生物技術領域，具體涉及一種利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法。

背景技術

苦糖果(Lonicera fragrantissima Lindl.et Paxt.subsp.standishii(Carr.)Hsu et H.J.Wang)屬于忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬屬郁香忍冬的亞種。該植物種在中國廣泛分布，多生長于海拔100-2000m向陽坡地內或溪澗旁。其果實具有較高的食用和營養價值。

近年來藍莓和枸杞等小漿果植物種開發較為充分，創造了較好的經濟和社會價值，開發新的小漿果植物品種，增添小漿果在市場中的占比份額勢在必行。苦糖果屬于小漿果類型植物，在中國零星分布，但集中人工種植較少，屬于尚未開發的野生植物種質資源，致使其繁育的植物材料非常有限。通過組織培養等生物技術顯然是能夠快速繁育苦糖果的重要技術手段。

發明內容

本部分的目的在于概述本發明的實施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施例。在本部分以及本申請的說明書摘要和發明名稱中可能會做些簡化或省略以避免使本部分、說明書摘要和發明名稱的目的模糊，而這種簡化或省略不能用于限制本發明的范圍。鑒于此，提出本發明。

作為本發明其中一個方面，本發明克服現有技術中存在的不足，提供一種利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法。

為解決上述技術問題，本發明提供了如下技術方案：一種利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法，其包括，將苦糖果越冬枝條的花芽去掉外表皮，留存黃綠色的花芽幼嫩部位；將所述花芽幼嫩部位消毒，接種至培養基上培養；其中，所述培養基為MS基本培養基，附加6-BA激素和/或IBA激素，所述6-BA激素與所述IBA激素的質量比為1：(1～2)；所述培養的溫度為26±1℃，光照強度為4000～6000lx，光照時長為12h的恒溫培養箱進行培養15～25天。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述消毒，其為利用酒精、次氯酸鈉、升汞進行消毒。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述消毒，其為先用酒精浸泡，再用次氯酸鈉浸泡，期間進行翻動，再用無菌水沖洗后用升汞浸泡，期間進行翻動；用無菌水沖洗后用無菌濾紙吸干表面水分即可。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述培養基還包括蔗糖和瓊脂粉，按質量份數計，所述蔗糖為300份，所述瓊脂粉為90份。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述培養基的pH為5.8。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述培養基經121℃高溫滅菌20min后，避光冷卻保存待用。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：所述接種，為保證所述花芽幼嫩部位基部有1～1.5mm嵌入所述培養基內。

作為本發明所述的利用苦糖果越冬花芽誘導愈傷組織形成的方法的優選方案，其中：培育的愈傷組織在分裂期形成的比例為10％以上。