[發明專利]一種融合抗菌蛋白的制備及應用有效
| 申請號： | 202010146580.0 | 申請日： | 2020-03-05 |
| 公開（公告）號： | CN111235119B | 公開（公告）日： | 2021-11-23 |
| 發明（設計）人： | 蘇鑫;崔新 | 申請（專利權）人： | 蘇州十一方生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/00 | 分類號： | C12N9/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/32;A61K38/16;A61K38/53;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京精金石知識產權代理有限公司 11470 | 代理人： | 張黎 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市工業園*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 融合 抗菌 蛋白 制備 應用 | ||
1.一種抗葡萄球菌融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白自氨基端到羧基端依次含有葡萄球菌噬菌體裂解酶LysK和抗菌肽Mersacidin的序列；所述的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一種編碼權利要求1所述的融合蛋白的基因，其特征在于，所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.一種重組表達載體，其特征在于，所述的重組表達載體包括SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
4.一種重組菌，其特征在于，所述的重組菌包括權利要求3所述的重組表達載體。
5.一種融合蛋白的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括以下步驟：
（1）人工合成SEQ ID NO:1所示核苷酸序列；
（2）將步驟（1）合成的序列連接到表達載體中，得到重組質粒；
（3）將步驟（2）得到的重組質粒轉化宿主菌，得到重組大腸桿菌；
（4）誘導重組菌表達抗葡萄球菌融合蛋白；
（5）收集步驟（4）得到的菌體，破碎細胞并對上清液進行純化；
（6）將步驟（5）純化得到的蛋白進行去毒處理，即獲得所述抗葡萄球菌融合蛋白。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的步驟（2）中所述的表達載體為pET32a(+)表達載體；所述的人工合成序列通過BamH I、Xho I酶切位點連接到表達載體。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的步驟（3）的宿主菌為BL21(DE3)宿主菌；所述的步驟（4）中誘導重組菌表達條件為0～1 mmol/L IPTG，4-37℃誘導。
8.權利要求1所述融合蛋白、權利要求2所述的重組表達載體、權利要求3所述的重組菌和權利要求4-7任一項所述的制備方法在防治葡萄球菌污染中的應用。
9.一種針對葡萄球細菌感染的藥物，其特征在于，所述的藥物中包含權利要求1所述的抗葡萄球融合蛋白。
10.一種葡萄球菌抑制劑或其添加劑，其特征在于，所述的抑制劑或其添加劑包含權利要求1所述的抗葡萄球菌融合蛋白。
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