[發明專利]一種修飾的單純皰疹病毒

有效

• 申請號: 202010145491.4
• 申請日: 2020-03-05
• 公開（公告）號: CN110982794B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 田超;趙婧姝;劉家家;孫春陽;李小鵬;周華;聞可心
• 申請（專利權）人: 北京唯源立康生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N15/869;A61K35/763;A61K48/00;A61K38/20;A61K38/19;A61K39/395;A61P35/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京彩和律師事務所 11688
• 代理人: 張紅春

本發明涉及一種修飾的單純皰疹病毒，其中該單純皰疹病毒缺失功能性ICP34.5編碼基因和功能性ICP47基因，并且來源于保藏號為CCTCC NO：V201810的病毒株。本發明還涉及包含該修飾的單純皰疹病毒的組合物以及由該單純皰疹病毒侵染的宿主細胞。

技術領域

本發明涉及一種修飾的單純皰疹病毒，或稱重組的單純皰疹病毒以及其作為溶瘤病毒的用途。本申請所述的修飾的單純皰疹病毒來源于皰疹病毒的非實驗室病毒株。與實驗室病毒株相比，本發明非實驗室病毒株的重組病毒具有增強的溶瘤能力和/或基因傳遞能力。

背景技術

單純皰疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）屬于皰疹病毒科，是有包膜的雙鏈DNA病毒，包括I型（HSV-1）和II型（HSV-2）兩個亞型。

單純皰疹病毒由核心、衣殼、間層蛋白和囊膜四部分組成。病毒核心由濃厚的雙鏈DNA構成，纏繞成纖絲卷軸。DNA外包圍的衣殼呈二十面體結構，直徑為100-110 nm，由162個殼粒組成。衣殼外由排列無規則、不定形的間層蛋白覆蓋。病毒最外層是帶短小突起的脂質雙層囊膜，包裹囊膜的病毒直徑為150-200 nm。病毒囊膜由11種糖蛋白和至少兩種非糖基化蛋白質組成，包括病毒糖蛋白B（gB）、病毒糖蛋白C（gC）、病毒糖蛋白D（gD）、病毒糖蛋白G（gG）和病毒糖蛋白M（gM）等。病毒囊膜糖蛋白的立體結構對病毒的細胞侵染能力有關，其決定了病毒能否進入宿主細胞及進入宿主細胞的病毒量。

目前，HSV-1病毒己經用于腫瘤、神經系統退行性疾病、遺傳性疾病和免疫系統疾病等重大疾病的基因治療，相比其它基因治療病毒載體，HSV-1病毒具有眾多優勢。

首先，HSV-1的基因組較大，可攜帶較大或多個外源基因。HSV-1基因組長達152kb，而腺病毒基因組僅有35 kb。HSV-1基因組的80多個已知基因中，約半數在體外培養中為非必需基因，可以被多個外源性治療基因所替換，它的最大外源基因插入量可以達到30-40kb。這對于治療許多疾病，尤其是多個基因相關的疾病尤其重要。

HSV-1侵染力強，溶瘤譜廣，溶瘤效率高。HSV-1為有包膜病毒，具有高度感染性，侵染細胞的能力明顯強于無包膜的腺病毒。HSV-1溶瘤譜廣，可侵染廣泛種類的腫瘤細胞。HSV-1復制周期短，溶瘤速度快，通常在12小時內完成一個復制周期。HSV-1轉染的腫瘤細胞溶解后，可以釋放數千個子代病毒體，這些病毒可以繼續轉染其它的腫瘤細胞。用Vero細胞系比較測定HSV-1與腺病毒的溶瘤活性，發現HSV-1的溶瘤活性比腺病毒高近10倍[KasuyaH,Takeda S, Nomoto S, et al.The potential of oncolytic virus therapy forpancreatic cancer.[J]. Cancer Gene Therapy, 2005, 12(9):725-36]。腺病毒載體臨床人體用量為10⁹-10¹² pfu，而HSV-1載體臨床人體用量為10⁵-10⁸ pfu，比腺病毒人體用量小1000倍。HSV-1除了通過細胞間隙擴展外，還可以通過細胞連接直接從一個細胞擴展到另一個細胞。這使得溶瘤病毒在實體瘤內既可有效滲透，同時幾乎不伴有全身傳播[Shen Y,Nemunaitis J. Herpes simplex virus 1 (HSV-1) for cancer treatment[J]. CancerGene Therapy, 2006, 13(11):975-992]。