[發明專利]一種豬圓環病毒2型及3型二價疫苗及其制備方法

在審

• 申請號: 202010144300.2
• 申請日: 2020-03-04
• 公開（公告）號: CN113355287A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 王建超
• 申請（專利權）人: 上海杰威醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/79;C12N7/00;C07K14/01;A61K39/295;A61K39/12;A61P31/20
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐迅;崔佳佳

1.一種基因工程細胞組合，其特征在于，所述基因工程細胞組合中包括第一基因工程細胞和第二基因工程細胞；

其中，所述第一基因工程細胞為真核細胞I，并且所述真核細胞I的基因組中整合有一豬圓環病毒外殼蛋白X的第一表達盒，或者所述真核細胞I中含有一表達載體，所述表達載體含有所述豬圓環病毒外殼蛋白X的第一表達盒；并且所述第一基因工程細胞在胞內表達所述外殼蛋白X，且所述外殼蛋白X在所述第一基因工程細胞內部形成第一病毒樣顆粒；

并且，所述第二基因工程細胞為真核細胞II，并且所述真核細胞II的基因組中整合有一豬圓環病毒外殼蛋白Y的第二表達盒，或者所述真核細胞II中含有一表達載體，所述表達載體含有所述豬圓環病毒外殼蛋白Y的第二表達盒；并且所述第二基因工程細胞在胞內表達所述外殼蛋白Y，且所述外殼蛋白Y在所述第二基因工程細胞內部形成第二病毒樣顆粒；

并且，所述豬圓環病毒外殼蛋白X和豬圓環病毒外殼蛋白Y是豬圓環病毒的兩種不同血清型。

2.如權利要求1所述的基因工程細胞組合，其特征在于，所述的豬圓環病毒外殼蛋白X為豬圓環病毒2型；和/或所述的豬圓環病毒外殼蛋白Y為豬圓環病毒3型；優選地，所述的豬圓環病毒外殼蛋白X的豬圓環病毒2型為2a亞型、2b亞型或2d亞型。

3.一種病毒樣顆粒組合，其特征在于，所述病毒樣顆粒組合中包括第一病毒樣顆粒和第二病毒樣顆粒，所述第一病毒樣顆粒和第二病毒樣顆粒分別由權利要求1所述的基因工程細胞組合中的第一基因工程細胞和第二基因工程細胞表達。

4.一種疫苗組合物，其特征在于，所述疫苗組合物是二價疫苗組合物，包括以下組分：

(i)如權利要求3所述的病毒樣顆粒組合；和

(ii)疫苗上可接受的載體。

5.一種制備如權利要求3所述的病毒樣顆粒組合的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)在適合表達的條件下，培養如權利要求1所述基因工程細胞中的第一基因工程細胞和第二基因工程細胞，從而表達第一病毒樣顆粒和第二病毒樣顆粒；和

(ii)分離所述的第一病毒樣顆粒和第二病毒樣顆粒。

6.一種經密碼子優化的分離的多核苷酸的組合，其特征在于，所述組合中包括編碼SEQID NO:1所示多肽的第一多核苷酸和編碼SEQ ID NO:2所示多肽的第二多核苷酸；

其中，所述第一多核苷酸選自下組：

(a1)序列如SEQ ID NO:3所示的多核苷酸；

(b1)核苷酸序列與SEQ ID NO:3所示序列的同源性≥95％(較佳地≥98％)的多核苷酸；

(c1)如SEQ ID NO:3所示多核苷酸的5’端和/或3’端截短或添加1-60個(較佳地1-30個，更佳地1-10個)核苷酸的多核苷酸；

(d1)與(a1)-(c1)任一所述的多核苷酸互補的多核苷酸；

并且，所述第二多核苷酸選自下組：

(a2)序列如SEQ ID NO:4所示的多核苷酸；

(b2)核苷酸序列與SEQ ID NO:4所示序列的同源性≥95％(較佳地≥98％)的多核苷酸；

(c2)如SEQ ID NO:4所示多核苷酸的5’端和/或3’端截短或添加1-60個(較佳地1-30個，更佳地1-10個)核苷酸的多核苷酸；

(d2)與(a2)-(c2)任一所述的多核苷酸互補的多核苷酸。

7.一種表達載體組合，其特征在于，所述表達載體組合中包括第一表達載體和第二表達載體；

其中，所述第一表達載體含有如權利要求6所述的多核苷酸組合中的第一多核苷酸，并且所述第二表達載體含有如權利要求6所述的多核苷酸組合中的第二多核苷酸。