[發(fā)明專利]一種基于火球菌鐵蛋白的新型冠狀病毒S蛋白雙區(qū)域亞單位納米疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010144032.4
• 申請日: 2020-03-04
• 公開（公告）號: CN111217919B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發(fā)明（設計）人: 張輝;馬顯才;鄒帆;袁耀昌;李镕;張旭
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/385;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 孫鳳俠

1.一種提高冠狀病毒抗原免疫原性的方法，其特征在于，所述方法將病毒的受體結(jié)合域(Receptor binding domain,RBD)和融合肽(Fusion peptide,FP)共同作為雙抗原，并與火球菌多聚物蛋白(Pyrococcus furiosus_Ferritin,Ferritin(PF))融合組成一個新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin后作為抗原；

其中，受體結(jié)合域RBD的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

融合肽FP的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

火球菌多聚物蛋白Ferritin(PF)的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述冠狀病毒抗原為新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原，所述冠狀病毒的受體結(jié)合域RBD和融合肽FP為新型冠狀病毒SARS-CoV-2的受體結(jié)合域RBD和融合肽FP。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原為新型冠狀病毒SARS-CoV-2的表面刺突蛋白(S蛋白)抗原。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，新型冠狀病毒SARS-CoV-2的RBD的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，F(xiàn)P的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，SEQ ID NO:1與SEQ ID NO:2可以直接連接，或兩者以鉸鏈區(qū)Linker相連構(gòu)成一個新的融和蛋白RBD-FP。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，當所述Linker為GGSGGSGGSGGSGGG時，所得融和蛋白RBD-FP的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，所述Ferritin(PF)的氨基酸序列如SEQ IDNO:4所示；SEQ ID NO:3與SEQ ID NO:4可以直接連接，或兩者以鉸鏈區(qū)Linker相連構(gòu)成一個新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述方法，其特征在于，當所述Linker為GSG時，所得融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述方法，其特征在于，融和蛋白再加上信號肽及純化標簽后，利用真核表達系統(tǒng)表達出抗原。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述方法，其特征在于，所述信號肽為分泌型信號肽(Signalpeptide,SP)。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述方法，其特征在于，所述純化標簽為His標簽 (His-tag)。

11.根據(jù)權(quán)利要求8所述方法，其特征在于，新型冠狀病毒SARS-CoV-2的SP、His-tag、RBD與FP融合的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

12.根據(jù)權(quán)利要求8所述方法，其特征在于，所述SEQ ID NO:4與SEQ ID NO:6所示序列可以直接連接，或兩者以鉸鏈區(qū)Linker相連構(gòu)成一個新的融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述方法，其特征在于，當所述Linker為GSG時，所得融和蛋白RBD-FP-PF_Ferritin的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

14.一種免疫原性提高的冠狀病毒抗原，其特征在于，依據(jù)權(quán)利要求1-13任一所述方法構(gòu)建得到的新的融合蛋白RBD-FP-PF_Ferritin。