[發明專利]一種基于稀土金屬的酶響應型探針及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010140295.8
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN113354703A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 劉?;陳學元;楊穎婕;張云欽;李幸俊;高航
• 申請（專利權）人: 中國科學院福建物質結構研究所
• 主分類號: C07H23/00
• 分類號: C07H23/00;C09K11/06;G01N21/64;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 陳玉平

1.一種基于稀土金屬的酶響應型探針，所述探針包括稀土金屬離子組和磷脂分子。

2.根據權利要求1所述酶響應型探針，其特征在于，所述稀土金屬離子組為選自鑭、鈰、鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔和鈧中的兩種或兩種以上的稀土離子構成的離子組；例如鈰-鋱、鈰-銪、鈰-鏑、鋱-銪、鈰-釹、鈰-釓、鈰-鉺、釓-銪、釓-鋱、釓-鏑、釓-鋱-銪或鈰-鐿-鉺離子組，優選為，鈰-鋱離子組。

3.根據權利要求1所述酶響應型探針，其特征在于，所述磷脂分子為含有磷脂鍵的分子，所述含有磷脂鍵的分子為三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)、三磷酸鳥苷(GTP)、二磷酸鳥苷(GDP)、一磷酸鳥苷(GMP)中的一種、兩種或更多種，示例性的為ATP。

4.權利要求1-3任一項所述的酶響應型探針的制備方法，包括：

1)將稀土金屬鹽的組合溶解于緩沖溶液中，配制成稀土離子溶液；

2)將磷脂分子溶解于緩沖溶液中，配制成磷脂分子溶液；

3)將步驟1)中的稀土離子溶液與步驟(2)中的磷脂分子溶液混合，得到所述基于稀土金屬的酶響應型探針。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中，所述稀土金屬鹽組合可以為能夠提供組成上述稀土離子組的兩種或兩種以上的稀土金屬鹽；所述稀土金屬鹽為鑭、鈰、鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔或鈧的硝酸鹽、氯化鹽、醋酸鹽、硫酸鹽、高氯酸鹽或其鹽類水合物；

優選地，步驟1)中，所述稀土離子溶液的總濃度為0.5-32mM；例如，1-30mM，1.5-28mM，2-25mM，2.5-20mM，3-18mM，例如，1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、16mM、17mM；

優選地，步驟1)中，當所述基于稀土金屬的酶響應型探針采用兩種稀土離子構成的離子組時，所述稀土離子溶液中兩種稀土離子的摩爾比為1:10-10:1；例如，1:9-9:1，1:8-8:1，1:7-7:1，1:6-6:1，1:5-5:1，1:4-4:1，例如，1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1；當所述基于稀土金屬的酶響應型探針采用三種稀土離子構成的離子組時，所述稀土離子溶液中三種稀土離子的摩爾比為(1-10):(10-1):(1-10)，例如(1-9):(9-1):(1-9)，(1-8):(8-1):(1-8)，(1-7):(7-1):(1-7)，(1-6):(6-1):(1-6)，(1-5):(5-1):(1-5)，(1-4):(4-1):(1-4)，(1-3):(3-1):(1-3)，如1:1:1，1:2:1，2:1:1，1:1:2。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述緩沖溶液為N-甲基-D-葡萄糖胺(MEG)緩沖液、2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)緩沖液、三羥甲基氨基甲烷-鹽酸(Tris-HCl)緩沖液；示例性地為Tris-HCl緩沖液；所述緩沖液的pH為7.0-9.0，優選pH為9.0；

優選地，步驟2)中，所述磷脂分子溶液濃度為0.5-32mM；例如，1-30mM，1.5-28mM，2-25mM，例如，1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、16mM、17mM；

優選地，步驟1)和步驟2)中配制所述溶液所用的溶劑為水。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述稀土離子溶液與所述磷脂分子溶液混合的體積比為1:5-5:1；例如，1:4-4:1、1:3-3:1、1:2-2:1、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1。

8.權利要求1-3任一項所述酶響應型探針的用途，其可用于檢測堿性磷酸酶。