[發明專利]一種快速創建甘藍型春油菜早花資源的育種方法

有效

• 申請號: 202010139921.1
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111334599B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 柳海東;杜德志
• 申請（專利權）人: 青海大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04;A01H6/20
• 代理公司: 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241
• 代理人: 宋紅賓

本發明公開了一種快速創建甘藍型春油菜早花資源的育種方法，(1)利用4個分子標記，篩選出分別含有cqDTFA7a位點和cqDTFC8位點的甘藍型春油菜單株，(2)用含有cqDTFA7a位點的單株和含有cqDTFC8位點的單株進行雜交，(3)雜交F1代進行小孢子培養，加倍成功的DH株系利用4個分子標記引物對進行基因型鑒定，篩選出同時含有cqDTFA7a位點和cqDTFC8位點的DH單株，(4)將篩選出的DH單株進行產量和花期鑒定，篩選出產量優良、花期早于親本3天的單株。通過分子標記輔助選擇目標性狀基因，避免雜交育種過程中目標性狀基因的丟失，提高選擇效率，并且縮短育種周期和減少工作量。

技術領域

本發明屬于油菜育種技術領域，涉及一種快速縮短甘藍型油菜生育期并創建優異早花資源的方法。

背景技術

油菜(Brassica campestris L.)是十字花科蕓薹屬植物，是目前世界主要的油料作物之一，同時也是中國主要的油料作物之一，其種植面積占全國油料作物的總種植面積的54％，而中國種植油菜的面積占世界油菜種植面積的20％。甘藍型油菜(Brassica napusL.)(AACC，n＝19)起源于歐洲，是油菜三大類型之一，是由白菜(AA，n＝10)與甘藍(CC，n＝9)通過自然種間雜交后雙二倍化進化而來的一種復合種。白菜型油菜的生育期較短，個體矮小，主要分布于氣候條件惡劣、無霜期較短的高海拔地區；甘藍型油菜產量高，菜籽較大，含油量高，主要分布于主要分布在無霜期較長、熱量條件較好的低海拔地區(海拔2800m)，在高海拔地區(海拔2800m)無法正常成熟。早熟油菜品種的生長發育具有苗期縮短，呈半直立或者直立狀態，葉色偏淡綠色；花芽分化早，開花早，花期持續時間長；生育期短，成熟期早，可避開高溫逼熟等優點(官春云等，2012；徐亮等，2011)。在油菜眾多的農藝性狀中，早花是早熟的前提條件，早熟性狀是當前油菜品種選育的一個重要性狀指標(張堯鋒等，2019)，在高海拔春油菜產區早熟育種尤為重要，該類地區白菜型油菜產量較低，品質差，而甘藍型春油菜產量和品質方面都優于白菜型油菜，但在生育期上不具優勢，因此，選育出早熟的甘藍型油菜代替青海等高海拔地區的白菜型油菜，對提高和改善現有高海拔地區油菜的產量和品質意義重大，這也是春油菜產區研究的主要內容(杜德志等，2018；柳海東等，2015)。

目前選育特早熟甘藍型春油菜油菜品系的方法如下：通過中熟甘藍型油菜與高海拔白菜型油菜種間雜交，獲得F1再隔離繁殖獲得F2，篩選染色體為38條、花粉可育率超過80％的F2單株進行小孢子培養，獲得DH系，再對DH系花期、農藝性狀及品質性狀進行鑒定。

傳統轉育早熟和抗倒伏性狀過程中主要存在以下缺點：1、選育工作量較大，甘白雜交屬于種間雜交，需要多代選擇才能達到目的；2、選擇效率較低：由于花期為多基因控制，其中涉及到的主效基因及微效基因較多，傳統轉育中對多基因進行有效聚合，難度較大，選擇效率較低；3、早熟與高產存在矛盾。

發明內容

本發明所要解決的技術問題為：如何提供一種快速創建甘藍型春油菜早花資源的育種方法，解決現有的育種方法工作量大、效率低的問題。

本發明的技術方案為：甘藍型春油菜早花主效QTL緊密連鎖的分子標記，所述主效QTL有兩個，分別為cqDTFA7a和cqDTFC8，其中與cqDTFA7a緊密連鎖的分子標記為SSR標記G1803和Indel標記IA7-4，與cqDTFC8緊密連鎖的分子標記為SSR標記S035和SNP標記SNP11；

SSR標記G1803由序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的引物對擴增得到；

Indel標記IA7-4由序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的引物對擴增得到；

SSR標記S035由序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的引物對擴增得到；

SNP標記SNP11由序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的引物對擴增得到。